Glavni pristupi za prenatalnu dijagnostiku genetskih bolesti. Izravno dijagnoza genetske abnormalnosti.

Metode molekularne dijagnostike - glavni proizvod i primarna struktura alat za analizu, tj slijed nukleotida u molekulu DNA - genom baza (nasljedne Uređaj) osoba. Prva faza velikog Internationala dešifriranja molekularnu strukturu programa istraživanja ljudske DNA je dovršen u 2000, stvarajući „nacrt ljudskog genoma.” U ovom dijelu ćemo se ograničiti na navedene osnovne principe metode DNK-based. Detaljnije s tehnikom molekularne studije može se naći u posebnim monografijama i udžbenicima.

dijagnostičke metode DNA-based, usmjeren na identificiranje mutacija ili molekularnu oznaku mutant kromosom je lančana reakcija polimeraze za sintezu DNA (PCR). Povijesno ranije Postupak blot hibridizacija Southern trenutno koristi mnogo rjeđe, iako se koristi za identifikaciju određenih mutacija, posebno dinamičkih mutacija”, što dovodi do širenja bolesti (Fragile-X sindroma, miotonicheskayadistrofiya, Huntingtonova koreja, broj neurodegenerativnih bolesti) i hemofilija a, i neke druge bolesti.

PCR postupak je predloženo 1983. od strane American znanstvenik Curry Mullis dodjeljuju ove otkriće Nobelovu nagradu 1993. Postupci za sintezu selektivno omogućuje (pojačan) in vitro relativno malim segmente DNA i ima dužinu od nekoliko desetina do nekoliko kilobaza, koristeći kao predložak DNA iz bilo sadrži sekvencu pojačan.

potreban uvjet za PCR je znanje o nukleotidnoj sekvenciji umnožene DNA regije, kao i specifična Izbor mjesta vrši se hibridizacijom templatnoj DNA s dva umjetno sintetizirati prajmer - DNA oligonukleotidnih sekvencija, obično od 15 do 30 bp komplementarni 3`-kraj amplificirane obroku smislu i antisense molekule DNA, respektivno. Razmak između primera određuje duljinu sintetizirane molekule. Detalji PCR tehnike produkcije može se naći u priručnicima.

PCR postupak On je postao jedan od glavnih u molekularnoj dijagnostici genetskih bolesti. Razvijen i naširoko koristi u praksi, različite varijante ove metode za brzo i učinkovito prepoznavanje mutacije, proučavanje DNA polimorfizama koji se koriste za molekularnu označavanje mutanata kromosoma.

Trenutno, postoje dva osnovna pristupa prenatalnu dijagnostiku, kao i općenito dijagnosticiranje genetskih bolesti:
- izravna dijagnoza temelji se na neposrednoj identifikaciju mutacija u određenom genu;
- indirektno (neizravna) dijagnostika, koja se temelji na označavanju mutiranog gena (ponekad se naziva „pacijent” obilježavanje kromosom nosi mutantni gen) koristeći molekularne markere.

Izravno dijagnoza genetskih abnormalnosti

Kroz izravne dijagnoze Identifikacija mutacija u genu. Prednosti metode - visoka (približava 100%) dijagnostičke točnosti, mogućnost PD i informativan analiza (prikladnost za molekularnu dijagnostiku) obitelji i prepoznavanje heterozigota prijevoznika u nedostatku dječjoj dobi.

u nema većih mutacije gena To zahtijeva detaljno molekularnu analizu (skeniranje) primarnu strukturu gena za otkrivanje mutacija koje se mogu pripisati nedostatke postupka.

Osnova bilo monogenskih bolesti su kršenja funkcija gena, uzrokovane različitim mutacijama u svojim značenjskim dijelova, odnosno, gen sekvencija kodirana za sintezu proteina (cDNA). Vrsti i mutacija spektri, kao i njihove fenotipske izraz (ozbiljnosti bolesti) su specifični za svaki gen i uglavnom određuje jedinstvenih značajki njegovoj primarnoj strukturi (nukleotidni slijed).

Poznato je također da je učestalost razlikuje mutacije u genu svakom razlikuje. Česti su „više sile” mutacije, dijagnostička vrijednost koja je osobito visoka, a „mali” (jedan sporadično), registriranje iznimno rijetki. Za mnoge od gena odgovornih za nasljedne bolesti, spektri mutacija su dobro proučeni i razvijeni optimalnih algoritama za njihovu identifikaciju. Na primjer, pozitivni gena za cističnu fibrozu je delF508 mutaciju, koja se nalazi u gotovo 50% od svih mutanata kromosoma u CF pacijenata u Rusiji gena fenilalanin - to R408W mutacija otkriven Y45% bolesnika s fenilketonurija u Rusiji, za distrofin gen se odlikuje dovoljno velike delecija, zabilježeno u 60% X kromosoma u pacijenata s Duchenneovu mišićnu distrofiju, itd

više detalja Algoritmi za molekularnu dijagnostiku razne monogenskih bolesti se daju u posebnim vodilicama, recenzije.