Adamts13

Tako, u normalnim uvjetima to proteaza cijepa na von Willebrandov faktor i multimeri stvara normalna i niske molekularne mase.

Nedostatak ADAMTS13 igra važnu ulogu u patogenezi tromboembolijskih purpura trombocitopenijom (Moshkovitsa sindrom), budući da je neuspjeh ove metaloproteinaze velike multimeri vWF su odgovorni za nekontroliranog stvaranja mikroagregata trombocita, blokira mikrocirkulaciju. U posljednjih nekoliko godina, smanjenje ADAMTS13 ne može naći samo kod sindroma mikroangopatije, ali i kronični glomerulonefritis, sepsa, ciroza jetre, DIC, i još mnogo toga.

Princip metode

Princip postupka (ELISA) na osnovi specifičnog vezivanja molekula ADAMTS13 antitijela na površini mikroploče. Nakon uklanjanja tvari koje nisu vezane za mikroploče, inkubira s enzimom-označenim protutijelima (konjugata). Kao posljedica toga, na površini mikro ploče dođe do pristupnih antitijela s enzimom kompleksima postojećeg gen anti-antitijela. Doda se nakon ispiranja 3,3`, 5,5`-tetra-metilbenzidin procijeniti aktivnost enzima ispitnu smjesu karakteristično bojanje. Intenzitet boje je proporcionalan aktivnosti enzima i prema tome, broj ADAMTS13 na uzorku.

Video: TTP ADAMTS13

Reagensi i oprema

• Mikroploča jažice prevučene s antitijelima na ADAMTS13.
• Pufer za uzorke.
• Pufer za ispiranje.
• Otopina supstrata (kromogena / kromogena - tetrametilbenzidin supstrata, - vodikov peroksid).
• Stop rješenje.
• Oprema za izvođenje ELISA (suđa, čitač za tablete i drugih.).

Distributer dijagnostički kit reagensa - CJSC "BIOHIMMAK".

Uzorci krvi za istraživanja kao uzorak za određivanje koncentracije ADAMTS13 BPT uporabu stabiliziranih natrijevog citrata pune krvi.

tehnika izvedba

Slijed radnji laboratorij liječnik u određivanju razine ADAMTS13 treba strogo slijediti upute na skup reagensima. Kalibratori preporučljivo istražiti duple definicijama.

Video: ADAMTS13 Teil 1

rezultati evaluacije istraživanja kako bi se utvrdilo da je koncentracija ADAMTS13 potrebno je izraditi kalibracijske krivulje. Na kalibracijske krivulje stavi Dobivena vrijednost apsorbancije mjerenjem uzoraka kalibracije. Zatim, međusobno povezane točke izvodi kalibracijske krivulje za određivanje koncentracije ADAMTS13 ( «točka-točka»). Inače, koncentracija ADAMTS13 je 50-140%.

Tumačenje ADAMTS13 rezultatima studije - matričnog odcijepi Willebrandov faktor. Niska koncentracija i / ili smanjuje aktivnost ADAMTS13 idiopatska trombocitopenijska purpura uzrok trombozom (Moshkovitsa sindrom). Moshkovitsa sindrom karakteriziran pet glavnih kliničkih manifestacija: neurološki poremećaji, disfunkcije bubrega, hemolitička anemija, trombocitopenija, groznica. Bolest je teško, i bez tretmana Patogeno temelji smrtnost doseže 90%. Sindrom Moshkovitsa često pokazuju pad u koncentraciji ADAMTS13 manje od 10%. No mnogo više od pomoći za dijagnosticiranje ove patologije je određivanje ADAMTS13 aktivnosti, kao u ovom slučaju, osim za kvantitativno smanjenje ove inhibicije mogu detektirati metaloproteinaza autoantitijela.

Mutacije gena koji kontroliraju sintezu ADAMTS13, u mogućnosti odrediti česti recidivi trombom, purpura trombocitopenijom. Kliničke manifestacije nasljedna ADAMTS13 nazivaju sindrom manjka Upshaw-Schulman (Upshaw-Schulman). U ovoj razini sindrom ADAMTS13 manji od 6,7%.

U vrijeme pisanja monografija, nažalost, nisu definirani jasno razlikovanje značajke trombozi purpura trombocitopenijom i hemolitički uremijski sindrom. Ipak, većina stručnjaka imaju tendenciju da vjeruju da je sindrom hemolitički-uremički ne poštuje smanjenje ADAMTS13, pa ovaj lik je veoma značajan za diferencijalnu dijagnozu te život opasnih stanja.

Uzroci pogrešaka

• Neuspjeh Temperatura način pohrane reagensa.
• Postupak ispiranja povrede (za ručno pranje se prati barem 4 puta).
• Miješanje reagensa iz različitih mjesta.
• Kondenzacija vlage u komore (kako bi se spriječilo pojavu kondenzacije ne bi trebao biti otvoren do paketa dok se grije do sobne temperature).

Ostali analitički tehnika dodavanja reagensa za mjerenje koncentracija ADAMTS13 postoji postupak za određivanje aktivnosti u metaloproteinaza. Nedostatna aktivnosti uzrokovan mutacijom ili autoantitijela protiv ADAMTS13.