Prijevod mRNA. Značajke mRNA prijevoda iz sintezu antitijela

biološka aktivnost mRNA izolirana pripravci

sadržaj

Video: prijenos postupak za plastičnu razmjenu
Video: predavanje 3. transkripcija, prijevod

ispitani glede njihove sposobnosti da se sintetizirati u stanici povezanih polipeptidnih lanaca. Određivanje sinteze peptida određenu vrijednost u odnosu na sve novo sintetizirani, on također može odrediti stupanj čistoće pripravi mRNA. Preduvjet je u ovom slučaju je upotreba proteina označavanje nije bilo jednostruke amino kiselina, a smjesa od najmanje 10 aminokiselina i radioaktivni kemikalije metode analize uz visoke rezolucije (npr dvodimenzionalni mapiranja peptida).

Za prijevodu mRNA sustavi bez stanica koriste tri vrste Krebs ascites hepatoma (Swan ea, 1972- Schechter, 1973 ..). zečji retikulocita (Stavnezer, Huang, 1971- Mach npr. a., 1973. do Cowan npr. a., 1976) i pšenice sadnica (Schechter, Burstein, 1976- Storb Marvin, 1976). Najpogodnije je, očito, je posljednji sustav. Prinos obilježenog prekursora u njemu je 0.1 pmol ili 2,6 ng do 0,007 jedinica uvedenih A2vo mRNA (Schechter, Burstein, 1976).

Budući da u ovoj fazi izazov opisan istraživanja je proučiti potencijalne prijevodni sposobnost mRNA, kao i sustav biljni i životinjski bez stanica u principu ponašati u tom pogledu isti (Schechter, Burstein, 1976), stupanj prikladnosti i prednosti sustava očito ovisi o sljedeća tri parametra: Veličina endogenog proteina sinteza (donji bolje), dostupnost i jednostavnost potrebnih sastojaka i količina mRNA koja mora biti u sustavu za dobivanje pouzdano istražena fuzijski protein.

Video: Prijenos postupak za plastičnu razmjenu

analoga bez-stanični sustav ponekad služiti kao žaba jajnih stanica. Pokazano je (Smith npr. A., 1973) da je uvođenje u oocite mRNA koja kodira imunoglobulinskih lanaca., Vodi na sintezu tih lanaca. Ova metoda je, međutim, složeniji i zahtijeva značajne količine mRNA.

Video: Predavanje 3. transkripcija, prijevod

većina eksperimenata nosi emitiranja s mRNA koje kodiraju sintezu L-lanac (L-mRNA), budući da je njihova separacija je mnogo lakše nego izolacija mRNA koja kodira za sintezu H-lanca (H-mRNA). Učenje translacije mRNA koje kodiraju imunoglobuline mijeloma L lanac je dovelo do neočekivanog rezultata. Nađeno je da mRNA u sustavima bez stanica kodiraju sintezu polipeptida (prekursor) većih dimenzija od zrelog L-lanca. Formiranje prvog teškog proizvod pod djelovanjem 13S mRNA plazmacitome MOPC 41 stanica opisanim swann suradnici (Swan EA, 1972.)., Pod djelovanjem 10-14S mRNA iz stanica plazmacitome MOPC 21 -. Milstein et al (Milstein i f,. 1972). Molekularna težina dobivenog produkta je veći od molekulske mase odgovarajućih L lanca (1500), od kojih je ostvaren time što sadrži 15 dodatne aminokiselinske rezidue.

kao kad se doda slobodnoj staničnom sustavu 355-formil-tRNA kao jedini izvor oznake 355-metionil otkriven u teškim komponentu, zaključeno je da je barem dio od tih dodatnih aminokiselina smještenih na NH2-koitse molekula L lanca (u eukariota Sinteza polipeptidna lanca počinje inkluzije metionin) , Kasnije sinteza podataka prethodnica su potvrđeni u pokusima s mRNA "sinteza kodiranja XL-lanci MOPC 70E (Toncgawa, Baldi, 1973), MPC" (Storb Marvin, 1976), MOPC 41 (Mach ea, 1973), MOPC 321 ( Schechter, Burstein, 1976), 63 MOPC (Schechter npr. a., 1976) i L lanci MOPC 104E (Burstein npr. a., 1976).

Dijelite na društvenim mrežama:

Povezan