Poteškoće i pogreške u mjerenju određenih hormona

Mjerenje razine hCG u mokraći seruma - najčešća laboratorijska ispitivanja u ginekološkoj endokrinologije. Tu Imunokemijske mjere Ispitivanje sustava koncentracija samo netaknute hCG molekule (dimer koji se sastoji od A - podgrupa) (? Slobodnog i članovi dimera), koncentracija od samo slobodnih podjedinice i koncentraciju svih podjedinica. Treća vrsta sustava za ispitivanje pruža najviše informativne rezultate i koristi se najčešće. Čak iu najboljim testnim sustavima u 1% slučajeva, tu je cross-reakcije s LH, tako da je razina rezultata mjerenja podjedinica hCG u niskim koncentracijama (< 5 МЕ/л) могут быть недостоверными Фолликулостимулирующий и лютеинизирующий гормоны. Для измерения уровне ФСГ и ЛГ разработано множество тест систем на основе РИА, иммунохемилюминесцентного анализа, ИФА. Все эти тест-системы обладают высокой чувствительностью и специфичностью, но откалиброваны они по разным эталонным стандартным образцам. В некоторых эталонных образцах биологическая активность ФСГ и ЛГ не соответствует их иммунореактивности. Если при калибровке тест-системы был использован подобный эталонный образец, то эта тест-система будет давать ложноположительные или ложноотрицательные результаты.

Prolaktin. Test sustavi za mjerenje prolaktina imaju vrlo visoku osjetljivost i specifičnost. Upute za test sustava u većini slučajeva su normalni koncentracije prolaktina rasponi za normalnu vrijeme mjerenja (između 8:00 i 11:00 sati). U međuvremenu, razina prolaktina u serumu varira tijekom dana. Konkretno, u ranim jutarnjim satima tamo prolaktin vrh sekrecije. Ako prolaktin izmjerena tijekom tih sati, njegova razina u usporedbi s normom navedenom u uputama može biti krivo smatrati povišen. Dugi niz godina se vjerovalo da palpacija dojki, kao i prijem lišiti bogata tirozin, triptofan ili arginin potiče izlučivanje prolaktina i hiperprolaktinemija oponašaju. Nedavna studija provedena od strane naše grupe odbacuje ove ideje.

Thyroidin hormona i TSH. Metode mjerenja tih hormona su praćka najbolji. Široko dostupna visoko osjetljivi test sustav za određivanje ukupnog i slobodnog T3 i T4. Test sustav mjerenja s ultravelike osjetljivost TSH - jedan femtomolar raspon. Ovaj arsenal testni sustavi s visokom točnošću dijagnosticirati kao hipotireoza i thyrotoxicosis.

Video: Što ako svaki put kada pokrenete Word radi prilagodbu Office

Estradiol. Ovaj hormon je prisutna u serumu uglavnom vezanom obliku, a to je u kompleksu s albumin i SHBG, kao i u konjugata glukuronske kiseline i sulfata. Udio slobodnog estradiola je ne više od 3% od ukupnog sadržaja u serumu. Samo slobodni estradiola povezuje se s unutarstaničnih estrogenske receptore i na taj način regulira mnoge procese u reproduktivnom sustavu, kao što su lučenja LH i FSH iz hipofize i razvoj folikula u jajnicima. Stoga procijeniti reproduktivnu funkciju najvažnijeg mjerenje razine slobodnog estradiola. Koncentracije slobodne estradiola u serumu malo: u trudnica, oni ovise o fazi menstrualnog ciklusa, u rasponu od 25 450 ng / L, kod djevojčica u različitim fazama puberteta - od 3 do 45 ng / ml, a u postmenopauzi obično ispod 30 ng / ml. Dakle, dijagnoza poremećaja seksualnog razvoja u djevojčica i neplodnost kod žena, kao i istraživanju postmenopauzalnih žena treba imati na umu da je Imunokemijske test sustav za mjerenje estradiola, koji se koriste u javnim i privatnim kliničkih dijagnostičkih laboratorija može imati nedovoljnu osjetljivost. Nadalje, rezultati mjerenja estradiola u jednog te istog bolesnika u različitim laboratorijima može široko varirati.

Čak iu većini osjetljivih i specifičnih imunokemijskih test sustava za mjerenje slobodnog estradiola u 1-2% slučajeva postoji cross-reakcije s vezanog estradiola. Ovaj poprečni reakcija može dovesti do lažno pozitivnih rezultata, ako je količina estradiola povećava (npr sa suviškom stvaranja njegovih konjugata). Najosjetljiviji i specifična metoda za mjerenje slobodnog estradiola - masenom spektrometrijom prethodi kromatografskog razdvajanja vezanog hormona, ali ova metoda je kompliciran, dugotrajan i dostupna je samo za specijaliziranim laboratorijima. Nedavno estrogen receptora u vanjskoj staničnoj membrani određenih stanica su otkriveni. U svim vjerojatnost, s receptorom interakciju ne samo besplatno, ali također se odnose na estradiola. Dakle, rezultati mjerenja slobodnog estradiola možda ne odgovaraju ukupnoj biološkoj aktivnosti estradiola u serumu.

Video: prostatitis bazen

Drugi steroidni hormoni. Sve što je rečeno o složenosti mjerenja estradiola, također vrijedi i za ostale steroidne hormone, njihove prekursore i metabolite. Na primjer testosteron cirkulira u krvi uglavnom u obliku kompleksa s SHBG i kortizola - kao kompleksa s proteinima transcortin. Dakle, u klinički dijagnostički laboratoriji koriste Imunokemijske sustav testiranja od dvije vrste: za mjerenje ukupnog testosterona ili kortizol i mjerenje slobodnih hormona. Najveći poteškoće u mjerenju slobodnog testosterona. Referentna metoda se smatra spektrometrija masa prije odvajanja hromatografije slobodnog i vezanog hormona, ali ova metoda je dostupan samo specijaliziranim laboratorijima. Široke dijagnostički laboratorij za mjerenje slobodnog testosterona i sredinom 2000-ih upotrijebiti RIA metodom s prethodne ekstrakcije bez seruma testosterona, koristeći organska otapala. Rezultati RIA su bili vrlo blizu one metode masovne spektrometrije. Međutim, RIA je izbačen iz opće laboratorijske prakse i analize immunohemilyuminestsentnym i Fa. Te metode često daju lažno pozitivne rezultate, naročito kada je mjerenje uzoraka s niskim koncentracijama testosterona. Ovu činjenicu treba uzeti u obzir pri ocjeni besplatne razine testosterona kod žena, dječaka u predpubertetskoj i ranog puberteta kod muškaraca sa sumnjom disfunkcije Leydigove stanice. Treba napomenuti da je razvoj i primjena metoda za imunokemijskom analizu steroidnih hormona, postoje i druge poteškoće. Na primjer, u pripravi steroidnih primarnih protutijela za poboljšanje njihove imunogenosti ih konjugiranih s različitim nosačima, kao što su metilirani albumin. Pri izradi sustava za ispitivanje na temelju RIA steroidi oznaku ³H ili ¹⁴C (jer oni ne mogu biti označeni ¹²⁵I). Stoga laboratorijske primjene kao test sustav mora imati scintilacijski brojač čestica.