Sadržaj oftalmologija-glutaminske kiseline u vlažnoj komori kod pacijenata s primarnog glaukoma otvorenog kuta

Mnogi autori glutamat čini neurotoxiceffect na mrežnice ganglijskih stanica. Moguće je da glutamicacid porast koncentracije u oku tkivima s primarnim otvorenim angleglaucoma (POAG), igra važnu ulogu u patogenezi vidnog živca glaucomaatrophy.

Očne vodice od 10 pacijenata s POAG uzimani su tijekom cataractextraction i ispitan. Količine glutaminska kiselina weredetermined kromatografskim postupkom.

koncentracija glutaminske kiseline u očnu vodicu kontrole groupwas 28,6 ± 1,6 mkg / mL, a u skupini s POAG - 84,9 ± 28,7 mkg / ml.The razlika nije bila statistički pouzdana. Tako je u glutaminsku kiselinu atendency povećanje koncentracije u očima withPOAG.

PPerforman istraživanja poslednihlet značajno utjecati na prezentaciju patogenezi vidnog živca glaukomatoznoyatrofii - glaukom optička neuropatija.

Utvrđeno je da je karakteristika manifestacija neuropatija glaukomatoznoyopticheskoy apoptoze - smrt ganglion kletoksetchatki. Quigley [6] smatra da je oštećena može vsledstvievysokogo IOP aksona stanica retinalnih ganglija i ne može se smatrati dostatochnoyinformatsii, što dovodi do aktivacije mehanizma prirodnog gibelikletki. Možda su ti procesi aktiviraju nedostatochnostyukrovotoka žile u oku, na povišenoj IOP. Pokazalo chtoodnovremenno s tim došlo je do značajnog povećanja soderzhaniyaglutaminovoy kiselina (glutamat) u staklastom tijelu bolesnika pervichnoyotkrytougolnoy glaukom (POAG). Glutamat je glavni neyromediatoromTsNS i mrežnica. U isto vrijeme povećava glutamatavyshe fiziološke razine koncentracije u retini uzrokuje blokadu mezhneyronalnoyperedachi živčane impulse u kombinaciji sa selektivnim i apoptozomganglioznyh mrežnice stanica zbog neurotoksičnim efektima glutamata [5]. Brooks D.E. et al. [7] naći u pasa oči glaukom eksperimentalnovyzvannoy povećava vitreal sadržaj glutamat, triptofan i niskim sadržajem glicina u odnosu na kontrolem.Po Prema autorima, visoka koncentracija glutamata je toksičan dlyagangliev mrežnice ishemijske mehanizam pokazuje poremećaji se pojavljuju u stanicama mrežnice.

Sama ideja neurotoksični učinak glutamata na nervnuyutkan, osobito mrežnice ganglion stanice, zaimstvovanaiz neuroloških praksa. Neurologa 20 godina znacheniebolshim dati koncentracije transmitera u razvoju takvih bolesti kao što su Alzheimerova bolest, multipla skleroza, demencija, amiotroficheskiybokovoy skleroza i drugi [4]. Povišene razine glutamatav staklovine pacijenata s glaukomom, smrt ganglion kletoksetchatki pod njegov utjecaj u eksperimentima na štakorima dopušteno E.B.Dreyer i sur. [6] sugerira da mehanizam svoje mjesto i gibeliimeet POAG. Međutim, uzrok intracelularne ne vypuskaglutamata potpuno jasno. E.B. Dreyer i sur. [6] vjeruje da možda visokog očnog tlaka uzrokuje vyhoduglutamata u unutarstanični prostor, indukciju stanične smrti, što je otrovno za ganglijskih stanica. Drugi vjerojatni prichinoygibeli stanice, prema autorima, je neuspjeh enzimskih sustava odgovornih za uništenje neurotransmiter od sinapse nakon vyhodaego. Poteškoća potvrđivanja tih pregleda zaklyuchaetsyav da je vrlo teško provjeriti činjenice o „live” oku, međutim, nema sumnje da velika koncentracija gutamata toksichnydlya živčanog tkiva.

S obzirom na gore navedeno, cilj našeg istraživanja bio obnaruzhenieglutamata u bolesnika s POAG.

Materijali i metode

Eksperimentalna skupina sastojala se od 10 bolesnika s POAG (6 muškaraca, 4 žene, prosječna dob - 74 godina), koji zabiralaskamernaya vlagu tijekom extracapsular ekstrakcije kataraktys antiglaukomatoznyh komponente. 8 pacijenti razvili stadieyPOUG 2 sa daleko napredniji. Kontrolnu skupinu činilo bolnyeso senilne katarakte - 14 bolesnika (11 muškaraca, 3 žene, prosječna starost - 68 godina). Glavni i kontrolne skupine bylisopostavimy dobi i srodnih somatskih bolesti.

Osnova postupka koji su opisali Bode stavi Giri metode kolichestvennogoopredeleniya derivati ​​aminokiselina u obliku bakra s njihovim ningidridinomposle kromatografskog razdvajanja na papiru u ovoj modifikaciji [1].

1. Priprava uzoraka za analizu. Uzorci kamernoyzhidkosti volumen 0,1-0,2 ml je izvagan na analitičkoj vagi i ispari do suhog na vodenoj kupelji na 40 ° C u staklu mikroploču koristeći plutajući stativa. Suhi ostatak se otopi u 0,05 mldistillirovannoy vodi.

2. Dobivanje dimenzija kromatograma zhidkostiglaza komora. 20 l dobivene otopine u obrocima od 5 L, uz pomoć automatske pipete se primjenjuje na kromatografski bumagumarki „brzi” veličine 2 x 27 cm. Postupak kromatografije provodyatniskhodyaschim dva puta, prvo u jednom smjeru smesirastvoriteley I, a zatim dva puta smjesa II. Smjesa je I: n-butilovyyspirt, ledene octene kiseline, destilirana voda (4: 1: 5). Smjesa II: n-butil alkohol, ledene octene kiseline, distillirovannayavoda (40: 15: 5). Nakon svakog prijenosa bumaguvysushivayut otapala na zraku, a zatim se stavlja u kromatografskom otapalu kameru.Vremya prolaz u jednom smjeru 7 sati. Vysushennuyuhromatogrammu uronjen nekoliko sekundi u 0,5% otopini ningidrinav aceton, osuši postati jasnije nakon dana poetomuopredelenie kvantifikacije aminokiselina u roku od nekoliko minuta, u zraku na 50 ° C za razvoj amino okraski.Pyatna ipodogrevayut 10 minuta u pećnici da se sljedeći provoditna dan.

3. Kvantitativno određivanje glutaminske kiseline u kamernoyzhidkosti oku. Ljubičasta točaka koje pripadaju glutaminovoykislote su izrezani, razrezani u male komadiće i stavljene u mikroepruvete sadrži 0,25 ml alkoholnom otopinom bakrenog sulfata. Fioletovayaokraska postaje narančasto-crvena obrazovaniyamednogo nastalog amino derivata s ninhidrinom. ekstrakcija Prodolzhayutv jedan sat na sobnoj temperaturi. Intensivnostokraski mjeri na photoelectrocolorimeter Humalyzer 2000 pridline valnoj duljini 505 nm u microcuvettes nabumagu protiv kontrolnog uzorka. Izračuni temelje na sadržaj aminokiselina provodi kalibrovochnomugrafiku dobivene od standardnih otopina glutaminske kiseline.

4. Izgradnja kalibracijske krivulje. Gotovyatrastvory glutaminska kiselina 0,001 M, 0.00075 M, 0.0005 M, 0,000375M, 0.00025 M. U radu se nanosi 20 ul otopine. Proizvodyatpo izračun formula:

K = (C x 5 x 10^-2) / V

A - koncentracija glutaminske kiseline u komori vlage (ug / ml), -C - sadržaj glutaminska kiselina nalaze na kalibrovochnomugrafiku (ug / ml) - V - volumen uzorka (ml).

Rezultati i rasprava

Sadržaj vlage u glutamat komore kontrolnoygruppe bila 28,6 ± 1,6 ug / ml, sa POAG - 84,9 ± 28,7 ug / mL (razlika nije statistički značajna, str>0,05).

Iako ne dobivaju i statistički značajne razlike vsoderzhanii glutamat POAG pacijenata i dob katarakta odnakoimeetsya jasan trend prema višoj koncentraciji vlage neyromediatorav komora POAG bolesnika. U 5 od 10 pacijenata sa POAG soderzhanieglutamata bio značajno veći u odnosu na komoru za vlagu kontrolnoygruppe i kretale su se od 37.6 pg / ml u 260.3 mikrograma / ml.

U bolesnika s najvećom koncentracijom sive mrene glutaminovoykisloty je bio samo 33 mg / ml.

Sudjelovanje pojedinih neurotransmitera u oftalmotonusapokazano regulacije u djelima A. Myagkova [2,3], koji je pokazao vliyanieopioidnyh peptide povećanju IOP djelujući elektricheskimikolebaniyami i kemijskih podražaja na amygdaloid kompleks.V podataka dobivenih rezultata ne može složiti sa gipotezoyusileniya apoptoze stanica retinalnih ganglija u njoj POAG vsledstvienakopleniya glutaminska kiselina. Međutim, to gipotezatrebuet daljnje istraživanje.

Istraživanja su pokazala po prvi put u komori glutaminovuyukislotu vlage u bolesnika s POAG. Sadržaj glutamatau pacijenata POAG nego u kontrolnoj skupini.

1. Medicinska laboratorijska tehnologija i dijagnostika: Meditsinskielaboratornye tehnologija. Reference u 2 volumena / Ed. A.M.Karpischenko // određivanje Mikrometoda slobodnih aminokiselina u syvorotkekrovi pomoću papira kromatografije. V.2. - St. Petersburg "Intermedika", 1999. - S. 106-109

2. Meka AV Utjecaj bušiti očni utjecaje uzrokovane električnim i kemijskim stimulacije mindalevidnogokompleksa: Avoref. disertacija. na soisk. znanstvenici. korak. C-. med. nauk.- Kazan 1997. - na 21.

3. Mekana AV Sudjelovanje opioidnih peptida u središnjem tlaka regulyatsiivnutriglaznogo i hidrodinamičkih očima // Zbornik radova. Dokladov7sezda oftalmologa Rusiji. - M., 2000.- S.175-176.

4. Plyahin IV Biokemijska osnova produžiti do kletochnoysmerti. // inter-regionalne zbirke znanstvenih. Rada / Biokemija narubezhe XXI stoljeća. - 2000.- Ryazan. - S.173-177.

5. Shamshinova AM Zueva MV, Tsapenko IV, Yakovlev AA Neyrofiziologicheskieosobennosti mrežnicu i moguće kliničke elektroretinografija .// Vestn. Oftalmol. - 1996.- №2.- S.52-55.

6. pojave glaukoma u dokumentu // slackinc.com), kirurških zahvata na oku News International Edition, 15. prosinac 1996

7. Koncentracija Vitreousbody glutamata kod pasa s glaukomom / Brooks, D.E., Garcia G.A. Dreyer E.B. na svim // Am. J. Vet. Res. - 1997.- Vol.58, N8.- P.864-867