11 Degidrotromboksan B2: određivanje metoda

Prethodnik tromboksana A₂ je arahidonska kiselina koja se akumulira u stanicama nakon aktivacije fosfolipaze. Pod djelovanjem arahidonata ciklooksigenaze-1 se može prevesti u prostaglandine, kratko G2 i H2, zatim - što je A tromboksana₂. Nastala i ispuštanjem tromboksan A₂ To uzrokuje brzo nepovratno agregaciju trombocita i spazma krvnih žila mala dodatna kalibra. U procesu metabolizma tvari proizvedene od jetre tromboksana B₂, te - 11-B degidrotromboksan₂, ukloniti iz organizma urina.

Od poluživota tromboksana A „je samo 30 s, praćenjem proizvodnje ovog materijala in vivo se obično provodi indirektno utvrđivanjem tromboksana B u plazmi ili njegov metabolit stabilniji - 11-B degidrotromboksana₂ - u urinu.

Princip metode

Metode kvantitativno određivanje 11-B degidrotrom boksana₂ na temelju EL1SA tehnologijama.

Reagensi i oprema

• Mikropločici jažice obložene sa protutijelima na 11-B u degidrotromboksanu₂.
• Kalibrator / kalibratori.
• Enzim konjugat (kunić ili kozjeg antitijela konjugirana s peroksidazom iz hrena).
• Pufer za uzorke.
• Pufer za ispiranje.
• Otopina supstrata (kromogena / kromogena - tetrametilbenzidin supstrata, - vodikov peroksid).
• Stop rješenje.
• Oprema za izvođenje ELISA (suđa, čitač za tablete i drugih.).

Uzorci urina za istraživanje

Koncentracija 11-B degidrotromboksana₂ Najčešće testirana na uzorku jutro urina. Kako bi se spriječilo stvaranje tromboksana in vitro i njegovih metabolita u uzorcima mokraće doda inhibitori prostaglandin (indometacin ili meklofenamična kiselina).

tehnika izvedba

Slijed radnji laboratorij liječniku u određivanju razine 11-B degidrotromboksana₂ treba strogo slijediti upute na skup reagensa. Kalibratori u dva primjerka se preporučuje za istraživanje definicije i koristiti novi kalibracijska krivulja za svaki dijagnostički kit serije.

Video: Kako doći MIDI note od pjesme na klaviru Roll u FL Studio za jedan klik. Kako odrediti acapellas bilješke

Evaluacija rezultata studija

Kod zdravih pojedinaca raspon koncentracija 11 degidrotrom boksana-B₂ u urinu 40-240 ng / mmol kreatinina (350-2100 ng / g kreatinina). Preporuča se formirala kontrolna skupina i neovisno odrediti normalnog raspona za svaki laboratoriju.

Studija je potrebno kontrolnih uzoraka s poznatim koncentracijama od 11-B degidrotromboksana₂.

Interpretacija rezultata istraživanja

Razina degidrotromboksana 11-B₂ To je najobjektivniji biokemijskog pokazatelj aspirinorezistentnosti, kao što pokazuje visoke vrijednosti ove tvari u urinu tijekom priprema za pročišćavanje koji sadrže acetilsalicilnu kiselinu. Suprotno tome, osjetljivost na aspirin, prema nekim autorima, može ukazivati ​​na smanjenje 50% B 11 degidrotromboksana₂ urinarna zbog oralnu aspirin 325 mg po danu.

Određivanje 11-degidrotromboksana In može se koristiti za procjenu aktivacije trombocita u različitim bolestima. Tu je informaciju o povezanosti visokih vrijednosti 11 B degidrotromboksana₂ u mokraći s razvojem ateroskleroze, komplikacije srčanih udara, itd, uklj bolesnika koji primaju antitrombocitno terapiju ....

Uzroci pogrešaka

• Hemoliza.
• Uzorci urina sadrže leukocita i eritrocita, mogu lažno povišena razina 11-B degidrotromboksana₂.
• Temperatura zatajenje skladištenja reagensa.
• Kondenzacija vlage u komore (kako bi se spriječilo pojavu kondenzacije ne bi trebao biti otvoren do paketa dok se ne zagrije).

VIDEO: dating metode. Dio 1. dendrokronologija

Ostale analitičke tehnike Definicija 11-degidrotromboksana razina B₂ temelju registriranoj interakcije antigena i antitijela, no to za kvantificiranje su dizajnirani i druge tehnologije za identifikaciju komponente imunog interakcija, na primjer s oznakom radioimunotest¹²⁵.