Svojstva protutijela aktivnih centara. reaktivnost imunoglobulina

način centrifuge oznaka dopušteno također shvatiti razlike u svojstvima zečjih protutijela na 2,4,6-trinitrofenil) (TIF nakon primarne i sekundarne imunizacije. Ta antitijela su ispitani pomoću razlikuju u prostornoj strukturi spin-obilježenim TNP-hapteni kao EPR-a i smanjiti prinos fluorescencije kvantni antitijela.

Utvrđeno je da antitijelo, nastaje tijekom primarnog i sekundarnog imunog odgovora su razlike u strukturi aktivnog mjesta. Kompleksi primarnih protutijela na hapteni manje krut i osjetljiv na organska otapala i na promjene prostorna ligandima.

Piett i zaposlenici (Piette npr. A., 1972) istraživali kompleksi negativno nabijeni centrifugirati označen benzoat i pozitivno nabijeni kompleksi spin-obilježeni zečjim trimetilfenilammoniya s odgovarajućim antitijelima. Sudeći po EPR spektrima, kompleksi antitijela s negativno nabijenim spin označeni hapteni stroži od kompleksa antitijela s pozitivno nabijenom spin-obilježenim haptena.
Osim toga, utvrđeno je da je stupanj imobilizacije N-O skupina spin-obilježenim benzoata u aktivnom mjestu vezanja varirati individualno na različitim kunića.

Hsia i Piette (Hsia, Piette, 1969) ispitali reaktivnost i strukturnu heterogenost zečjim anti-DNP antitijela. Usporedili su EPR spektri protutijela izolirana putem homologne DNP - (anti-A) i poprečni hapten (anti-T), nakon međudjelovanja sa spin-obilježenim DNP (DNP-CM). Amax EPR spektar kompleksa anti-DNP-D- i CM nađeno je da 59 Gaussa, kompleks spektar Amax (anti-DNP + T CM) - 62 Gaussa.

Amax je funkcija vremena korelacije i polariteta okoliša N-O grupe (Hamilton, McConnell, 1970). Dakle, ove razlike u EPR spektara može biti zbog imobilizacijom ili više N-O skupine u složenim (anti-DNP-D + OM), ili više hidrofobnih okoliša. U svakom slučaju, oni ukazuju na strukturne razlike anti-D i anti-T aktivnih centara.

U drugom nizu pokusa ispitivanom kompleksi anti-D homologni s DNP-SM i cross-spin označeni hapteni orto i para-nitrofenol: ONF-SM i SM-nNF. Amax križ EPR spektri spin-obilježenim hapteni, ANE i LNF-SM-SM odlagati u aktivnim mjestima, također je bila veća od homologne DNP-CM.

Autori pripisuju činjenici da homologna hapten Ona se nalazi u aktivnom mjestu, tako da je oznaka N-O grupe, ne direktno komunicirati s aminokiselinskih ostataka aktivnog mjesta. S druge strane, unakrsno haptenom složenije oblike manje kruti, u kojem se žig ima veći stupanj slobode, što omogućuje da se u interakciji s hidrofobnim dijelovima aktivnog središta. EPR spektri spin-obilježenim hapteni prelaze razlikuju od homolognih još uvijek prisutnost komponente koje odgovaraju brži rotacije.

To može biti zbog postojanje ravnoteža između dva spina orijentacija mechepyh-hapteni u aktivne centre ili nejednake afinitet za različite populacije protutijela specifičnih za dotični haptena.