Struktura aktivnih centara antitijela. Proučavanje aktivnih mjesta imunoglobulina

Hsia i Piette koristeći monovalentne i dvovalentni spin-označeni hapteni DMF istraživali smo dubinu i heterogenost aktivnih mjesta zečjim anti-DNP antitijela. Su proučavali ovisnost korelaciju spin-obilježenog monovalentni DFT-hapten vezan na aktivno mjesto antitijela iz Ha + d 1Ds, u - dužina haptena, d - razmak između hapten i oznaku, koja se može mijenjati povećanjem ugljikovodični lanac između njih.

Ako promijenite Ha + d od 10 do 12 A Autori primijetio oštar pad korelacije vremensku oznaku koja se potom promijenio malo. Ovo smanjenje je zato Ha + d u gornjem dijelu raspona prelazi dubinu aktivnog mjesta i oznake, ostavljajući postaje mogu slobodno okretati. Iz toga slijedi da je dubina od aktivnih mjesta je 10-12 A. Slični rezultati su dobiveni u eksperimentima s bivalentnim hapteni.

Kada se dodaju na antitijelo dvovalentni hapten razmatranog u suvišku ESR spektar čvrsto imobilizirane stvaranja dimera, odnosno trimera antitijela. Minimalna duljina dvovalentnog hapten, pri čemu je sposobnost da se veže dvije molekule antitijela, i dalje ostao je jednak 21 A. Očito je minimalna dubina aktivnog mjesta je 10.5 A.

veličina antitijela aktivnih centara, Čini se da ovisi malo o specifičnosti vrsta. Stoga, koristeći isti postupak dosljedno povećanje udaljenosti između DFT i spina oznaku, pokazano je da se dubina aktivnih centara pile anti-DFT-antitijela i IgA mislomnyh mišjeg MOPC 315 koji ima visoki afinitet prema DNP 10 ± 1 A. Druga grupa autora upoznavanje centar Fv-fragmsnta strukturu proteina MOPC 315 spin-obilježenim hapteni, je došao do istog rezultata.

Dakle, informacije aktivne dubina antitijela centara, dobiti spin oznaku, su u dobrom slaganju s analizom rendgenskih zraka.

Spin-označene hapteni Korišteni su (Willan EA, 1977.). za komparativne studije aktivnih mjesta slijedećih veličina mislomnyh IgA anti-DNP aktivnosti: MOPC 315, 460 i SIDS XRPC 25. Analiza imunih kompleksa EPR spektri spin-obilježenim DNP i neki od njegovih derivata s obzirom na ove hapteni stereokemije doveli su do slijedećih zaključaka. Dubina aktivnih centara tri identična IgA (11 - 12 A), ali postoje razlike u poprečnim dimenzijama centara na ulazu.

Za XRPC 25 ova dimenzija 7,5X8 A tijekom MOPC 460>10X 11 X A „i SIDS 315B>8h11A. Sva tri proteini imaju vezna mjesta lantanndov La III i GD III. Interakcija između tih mjesta i aktivnim centrima. MOPC 160, a udaljenost između 315 metala i N-O skupina spin-obilježenim haptena oko 10 A, a XRPC - 25-20 A.

Magnetska rezonancija nuklearna (NMR), visoke rezolucije (270 MHz), primijenjena je na isti skupine autora proučiti aktivno mjesto Fv-fragment MOPC 315 (Dower npr. A., 1977). Specifični proračuni moguće odrediti geometriju aktivnog mjesta u svezi s DNP haptena koji čini su van der Waalsove interakcije sa središnjim četiri aromatske aminokiseline.

Utvrđeno je da su bendovi u spektru NMR, odgovarajući fenilalanin ili tirozin ostatke, proširiti u prisutnosti haptena. Najvjerojatniji objašnjenje za to - nepokretniji odgovarajuće ostataka sposobnih varirati s učestalosti od oko 104 Hz.