D-dimera: ono što je norma

Djelovanje enzimskog kompleksa tPA-plazminogena proizveo enzim sposoban uništavanja fibrinskog ugruška, - plazmina. Vrijeme razgradnje fibrina nosili ključni enzim u fibrinolitičkom sustavu za protofibrile (D-D-E-D-D-E-D-D) su odvojeni D-dimera (D = D) i E fragmenata (-E-). Budući da su D-dimera D-D vodi (unakrsno povezivanje), koji su odsutni u fibrinogen, fibrin monomera i polimera rastresitog fibrin, čime se povećava njegova koncentracija u krvi pokazuje ostvarenje aktivaciju koagulacije i fibrinolize.

Princip metode

Načelo metode ELISA obzirom na specifično vezanje D-dimer monoklonskog antitijela na površini mikro pločicu. Nakon uklanjanja tvari koje nisu vezane za mikroploče, inkubira s enzimom-označenim antitijelom) (konjugata. Kao rezultat toga, na površini mikro ploče nastaje prijamu antitijela s enzimom kompleksa na postojeće D-dimera-anti-O-dimera. Doda se nakon ispiranja 3,3`, 5,5`-tetrametilbenzidin omogućuje procjenu enzimske aktivnosti po karakterističnim obojenosti ispitne smjese. Intenzitet boje je proporcionalna enzimske aktivnosti, a u skladu s tim, količina analita u uzorku.

Reagensi i oprema

• Enzim konjugat (kunić ili kozjeg antitijela konjugirana s peroksidazom iz hrena).
• Mikroploča prevučene s anti-D-dimer rupe.
• Kalibrator / kalibratori.
• Pufer za uzorke.
• Pufer za ispiranje.
• Otopina supstrata (kromogena / kromogena - tetrametilbenzidin supstrata, - vodikov peroksid).
• Zaustavljanje otopine (0,5 M sulfatna kiselina).
• Oprema za izvođenje ELISA (suđa, čitač za tablete i drugih.).

Distributer dijagnostički kit reagensa - CJSC "BIOHIMMAK".

Uzorci krvi za istraživanje

Kao uzorak za određivanjem koncentracije D-dimera, uporabu stabiliziranih plazmi natrijevog citrata krvi. Značajke pripremu uzoraka ispituje detaljno u Dodatku 3.

Video: Povećanje D-Dimer sa IVF (? Da li e-dimera implantacije)

Metode određivanja

Reagensi uključeni u kit, a ploča prije analize bi trebali biti na sobnoj temperaturi. Slijed radnji laboratorij liječnik u određivanju razine D-dimera mora strogo u skladu s uputama seta.

Video: Express analizator srčani biljezi i D-dimera RAMPA Reader

Rezultati evaluacije studije za mjerenje koncentracija D-dimera je potrebno koristiti kalibracijske krivulje. Kalibratori u dva primjerka se preporučuje za istraživanje definicije, kao i izgradnju nove kalibracijske krivulje za svaki novi dijagnostičkih kitova. Konstruirati pomoću kalibracijske krivulje Dobivena vrijednost apsorbancije u otkrivanju različitih koncentracija D-dimera.

Treba naglasiti da je u vrijeme pisanja monografije univerzalno prihvaćeni standard D-dimer, tako da proizvođači koriste razne dijagnostičkih kitova i uzoraka jedinica za njegovo određivanje. Osim tradicionalnih indikacije težinski sadržaj po jedinici volumena (mg / L ng / mL, ug / ml, mg / l, nmol / l), broj proizvođača dijagnostičkih kitova sugestijama određivanje D-dimera ocijenjeni u jedinicama ekvivalentnih fibrinogena (FEU mg / L).

Video: Podmazivanje mjenjača brusilica (LBM)

Ova značajka je vrlo važan čimbenik, budući da se u različitim ostvarenjima predstavljanja rezultata istraživanja pojavljuje koncentracije (mg / ml), te normalnog raspona i rezultati za određivanje različitih mjernih jedinica razlikuju od oko 2 puta. Često, zbog nedostatka jedinstvene standarde, razlike u pozadini mnogih patoloških stanja (DIC, plućna embolija i nekoliko drugih) kada se koristi različite mogućnosti za izražavanje rezultata razlikovati za više od 2 puta.

Formula za izračunavanje rezultata određivanja koncentracije D-dimera u SI jedinice: [nmol / l] = [ug / ml] x 5476. Najčešće korišteni težine jedinice odgovaraju jedna drugoj na sljedeći način: 250 ng / ml, 0,25 ug / ml = 0.25 mg / L = 250 g / l.

Normalna koncentracija raspona od D-dimera treba odrediti u svakom laboratoriju sa značajkama opreme i potrošnog materijala. Normalne razine, D-dimera navedeni većina proizvođača je manja od 250 mg / L, manje od do 0.5 mg / L FEU. Budući da je poluživot D-dimera je više od 24 sata, njegova razina je stabilna dovoljno dugo.

Procjena rezultata ispitivanja treba provesti uzimajući u obzir definicije ispravnosti. Za kontrolu kvalitete svake kontrole laboratorija predlažu da koriste materijale s jedinicama koje je preporučio proizvođač.

Interpretacija rezultata istraživanja

Određivanje koncentracije D-dimera često se koristi za detekciju i tromboze tromboembolije. Specifičnost ovog indeksa u odnosu na trombotskih poremećaja je ograničen, jer je taj indeks raste, i na mnogim drugim patološkim stanjima.

Unatoč ograničenim specifičnosti testa, to je vrlo visok informacije tromboza sadržaj i tromboembolija, jer test pokazuje vrlo dobru negativnu prognozu razini, tj. E. rezultat negativan test je gotovo uvijek svjedoči o nedostatku tromboembolijskih procesa.

Visoka razina D-dimera tumačiti uzimajući u obzir rezultate drugih testova i kliničke bolesti. Ovaj indeks je također koristi za procjenu antitrombozne učinkovitost terapije.

Druge analitičke tehnike Osim ELISA za određivanje D-dimera koji se koristi i drugim tehnikama (imunokemijskih immunoturbidimetry, immunohemilyuminestsentsiya, lateks aglutinacije, imunokromatografiju, membrane imunodifuzije). Na tržištu su široko zastupljeni semikvantitativna metode je odlučujući. Mnogi moderni modeli automatskim i poluautomatskim coagulometers mogućnosti kvantificirati razinu D-dimera pomoću immunoturbidimetry.

Uzroci pogrešaka

• Nepoštivanje način za pohranu temperatura.
• Povreda postupka za ispiranje (na ručno ispiranje treba biti 3-4 isprane barem puta). Nakon ispiranja odvodne ploče na filter papiru kao tekućine, tipično je preostala u jažice nakon ispiranja, mogu interferirati s nižim supstratom, a optička gustoća uzorka.
• Miješanje reagensa iz različitih mjesta.
• Kondenzacija unutar jažice. Kako bi spriječili pojavu kondenzacije ne bi trebalo otvoriti paket do tada, dok se ne zagrije na sobnu temperaturu.