Osnovna načela citogenetskog prenatalne dijagnostike.

trenutno, Problem citogenetičke dijagnostika

Prednosti i nedostaci citogenetskog analize kada se koriste različite metode dobivanja pripravaka iz kromosomske fetusa uzorci materijala su prikazani u tablici.

Koristi se u većini centara kompleks citogenetskog i molekularne citogenetičke dijagnostičke metode pruža najpotpunije informacije o fetalnog kariotipa u različitim fazama razvoja fetusa.

Video: citogenetski. Biopsija korionski resica od propuštenog pobačaja

Kada prenatalni karyotyping To bi trebao biti vođena načelima analize kromosoma lijekova međunarodno prihvaćenim kliničkim citogenetika i odobreni od strane Ministarstva zdravstva, kao i pravilima međunarodnog nomenklature opisuje carnotite.

Značajke citogenetskom analizom stanica razni fetalnog podrijetla stanica amnionske tekućine Stanice AF su predstavljeni s nekoliko tipova različitog porijekla:
- stanice amnionske membrane (zapravo amniocytes)
- fetalne epitelnim stanicama (epidermisa, gastrointestinalnih, genitourinarnog trakta i respiratornog, sluznica usne šupljine).

Video: Roditelj klub (2015/11/25 - Dio 1)

Kvalitativni i kvantitativni sastav AF stanica i koncentracija živih stanica imaju individualnu varijabilnost i ovise o stupnju razvoja. Optimalno za citogenetskog istraživanja je amnionska epitel - aktivno razmnožavanje stanica klon specifične za određenu kulturu. U međuvremenu precizna identifikacija tipova stanica sposobnih mitoze podjela i klonoobrazovaniyu pod in vitro kulturi stanica, vrlo teško.

Najčešće za uzgoj Korištene amnionske stanice dobivene u razdoblju od 15-18 tjedna trudnoće. Primjena za ovu svrhu amniocytes ranije (12-14 tjedna trudnoće) ili kasnije (nakon 20 tjedna trudnoće) uvjeti moguće je u principu, ali u pravilu, znatno komplicira i produžuje dijagnostički postupak, povećava broj neuspjelih pokušaja.

Standardne kultiviranje stanice AF uključuje sljedeće korake: postavljanje kulture, subkulture, hipotoničan tretman, i fiksaciju. Unatoč širokoj upotrebi staničnim kulturama AF u svijetu, što je uobičajena tehnika za kromosoma pripreme su nepostojeći. Za uzgoj stanica AF koristiti dva glavna pristupa razlikuju u načinu za proizvodnju kolonije i metode fiksacije.

Video: nova generacija sekvenciranje: načela, mogućnosti i perspektive - Maria Logacheva

1. Tikvica se metoda-stanica kulture Pacijenti u ovjesne i fiksacija hranidbeni lanac nakon tipizacije. Analiza je provedena u dva od tri kultura (10 metafaza po uzorku). Ako su svi Metaphase ploče promatrati istu kariotip, dijagnoza je uspostavljena. U slučaju jedne metafazi s aberantnim kariotipa (strukturno ili brojčano) analizirana zamjensku novu kulturu. Ako jedan te isti kromosomska aberacija određuje više metafazi iz jedne boce, ali nije potvrđeno u drugim bocama, dijagnoza „psevdomozaitsizm”. U slučaju istog kromosomskih abnormalnosti u više od jedne boce, dijagnoza je postavljena „pravi mozaicizam”.

2. Postupak in situ - Uzgoj i fiksacija stanica na pokrovnim u petri ili posebne boce - slajdova. Analiza je provedena na pločama metafazi tri posude za kultiviranje (analizirano je ukupno 10 kolonija). Kada je detektiran abnormalni klon analiziran vsekultury. Kromosomske aberacije uočene samo u jednoj šalici, ukazuje na „psevdomozaitsizme”, više od jednog - „prava mozaigshzme”.

Postupak standardne uzgajanja amniocytes od zaprimanja uzorka pa sve karyotyping traje u prosjeku 14-21 dana. Nedostaci su visoka cijena podloge za uzgoj i opreme, što je važno za domaće laboratorije, kao i visoka (do 2%), vjerojatnost kontaminacije uzorka majke izvedene stanice.

U posljednjih nekoliko godina, on je razvio novi pristup Analiza kromosoma stanica u kulturi. «Pipett» Metoda se temelji na izolaciju mikromanipulyatsionnoy metafaznyhiprometafaznyhkletokiz nesuspenzionnyh usjevi uslijed ihmorfologicheskim značajke i slabljenje zbog podloge. Daljnje hypotonic liječenje i fiksacija provode se na pojedinim stanicama. Ova metoda smanjuje rok kulture na neskolkihdney i, što je najvažnije, smanjiti rizik od dijagnostičkih pogrešaka uzrokovanih oba mozaicizam i kontaminacija uzorka. Priprema prometafaza i metafaze ploče na taj način može iz bilo kojeg primarnog i transplantiranih usjeva. Nažalost, skupe opreme i radne snage spriječiti široko usvajanje ove progresivne metode u kliničkoj praksi.