Toksoplazminom imunološko u liječenju kronične toksoplazmoza

Toksoplazmoza - protozoa zoonoza s latentnom preimuschestvennohronicheskim nad kojom teče znakovi porazheniyanervnoy sustava, organa retikuloendotelnog sustava, cross-polosatoymuskulatury i organa vida.

Uzročnik - Toxoplasma gondii - obvezuje vnutrikletochnyyparazit sa složenom životnom ciklusu u kojem muškarac i bolee300 vrsta životinja i ptica su intermedijarni domaćini.

Hitnosti toksoplazmoza studija je određen, prvenstveno se veže ove patologije su imunodeficijencije (HIV infekcija jedinstvenosti). Nadalje, opisuje vodene i jestivu vspyshkizabolevaniya [7]. S obzirom na visoku stopu infekcije u populaciji (od 20 do 90% u različitim dijelovima svijeta) i polietiologichnostimmunodefitsitov (uključujući produženo glukokortikoida, terapije sa citostaticima, izlaganje zračenju it.d. ionizirajuće), potrebno je proučiti uzroka reaktivacije latentnoprotekayuschego procesa.

Je dokazano da je protok znak određuje toksoplazmoza sostoyaniemimmunnoy mikroorganizama sustav [2]. Akutni toksoplazmoza (OT) se razvija kao rezultat primarne infekcije mikroorganizmima toksoplazmamineimmunnogo [4]. Razvija na RT reakcije kompleksprisposobitelnyh makro- i mikro-organizama zakanchivaetsyaformirovaniem nesterilnu imunitet.

Dugotrajna postojanost sredstva uz „lebde” koncentracija specifičnih antitijela proizvedenih pomoću klona antigen spetsificheskihV pamćenja limfocita [1]. Ova faza bolesti nazyvaetsyahronicheskim toksoplazmoza (HT) i prirodni proces iskhodomostrogo.

Dovoljna količina memorije T- i kliničke manifestacije bolesti obuslovlivaetotsutstvie B stanica (latentni techenieHT). Međutim, u nekim slučajevima (1-5% zaraženih) proiskhoditreaktivatsiya latentnu infekciju [3]. Ova kategorija uključuje „imunosustava” osobe, uključujući sekundarne imunodeficijencije (HIV infekcije i jatrogene - nekontrolirano antibiotika, citostaticima, glukokortikoid terapija itd).

Poznato je da je glavna uloga u sprečavanju aktivacijski latentnogoHT pripada stanične komponente imunološkog sustava. Olovo zvenomv prevenciju reaktivacije sinteze značajna kolichestvainterferona-gama (IFNgT limfociti) senzibilizirani antigenima Toxoplasma [5].

Od 1958. godine, na Klinici za infektivne bolesti RossiyskoyVoenno medicinske akademije provedeno istraživanje razlichnyhaspektov HT. Ugrađeni AP Kazantsev (1961) Metoda spetsificheskoydesensibilizatsii toksoplazminom postiže otporan na remissiiu 90% pacijenata nakon jednog tečaja. Međutim, samo posledniegody, prilika za proučavanje imunološkog sistemybolnyh kemoterapije s odgovarajućim imunološkim metodama.

Svrha studije

Znanstveni obrazloženja toksoplazminom mehanizam djelovanja na procjenu osnovaniikompleksnoy kliničkih laboratorijskih i immunologicheskogomonitoringa bolesnika s kroničnim toksoplazmoza.

Materijali i metode

U istraživanju je sudjelovalo 70 pacijenata s kliničkim manifestacijama obostreniyaHT (reaktivacije latentnih HT). Dijagnoza naosnovanii Prisutnost kliničkog pogoršanja razdoblja isklyucheniyadrugih sindromoskhodnyh bolesti infitsirovannnostitoksoplazmami otkrivanje (prisutnost specifičnog Ig G toxoplasma, vyyavlennyhimmunofermentnym analiza) zamedlennogotipa izražen preosjetljivost na antigene Toxoplasma rezultira intradermalno probys toksoplazminom razrijeđen 10 puta s 0,85% natrij hloridanatriya. [Toksoplazminom predstavlja složene stanice membranskih antigena naruzhnoypoverhnosti T. gondii (Soj RH) belkovoyprirody (t, N. SAG), dobiven vodom i eterom (ekstrakcija Odessa postrojenja za proizvodnju pripravaka bakterijskih)].

Svi pacijenti su izmjerena količina CD-4 +, CD-8 +, B-IgG + (monoklonalnymiantitelami od L.A.Kozhemyakinu et al., 1987), Ig G toxoplasma (ELISA test-sustava "La Roche"), slika RTML s toksoplazmennymantigenom (George et Vaughan 1962 Bulankovas modifikacija YI et al., 1993), "aktivan" interferon (u daljnjem tekstu - IFN-akt) "aktivni", gama-interferona (u daljnjem tekstu - IFN-g-akt) i „aktivan” interferon-alfa (IFN u nastavku-ACP) biološke metode. Takzheopredelyali ukupna koncentracija IFNg(U daljnjem tekstu - IFNg-Društvo) i interleukin-4 (u daljnjem tekstu - IL-4), pomoću ELISA korištenjem komercijalnih analizas ispitne Systems Ltd "Protein konturu" (Petrograd) i "citokin" (Petrograd). Chuvstvitelnostmetoda bila je 10 pg / ml. Osim toga (kontrolna skupina) su ispitali 10 bolesnika bez kliničkih manifestacija toksoplazmozav povijesti (latentni oblik HT).

Svi bolesnici su podijeljeni u skupine prema effektivnostyuterapii. Skupina 1 - 58 pacijenata s prijelaza latentnuyufazu bolest (cikličke oblike za simptomatsko kronične toksoplazmoza), grupa 2 - 12 bolesnika s ponovljenim pogoršanje HT za blizhayshegogoda nakon tretmana (na relaps oblika simptomatske hronicheskogotoksoplazmoza). Kontrolna skupina - 10 klinički zdrave litss prisutnost Ig G toxoplasma (primarnu bolest latentne) .Gruppy usporediti u spolu, dobi, harakterupitaniya, socijalni status premorbidne pozadini.

Ispitivanje pacijenata provedena je dinamika akutne, neposredno nakon imunomodulacija toksoplazminom (intradermalno u razrjeđenjima s povećanjem koncentracije obscheydoze do 0,3 ml prirodnog lijeka), i 4 tjedna nakon liječenja okonchaniyakursa. Ni u jednom slučaju nije uočeno je bočni reaktsiyna toksoplazminom uprave. Detalji metode primjene liječenja kemoterapijom toksoplazminav opisan u [1]. Pokazatelji imune stanice, koncentracija aktivnog interferona i ispitana je u 3-6 mesyatsevposle liječenja.

Statistička analiza rezultata koristiti program „Statgraphics pro Win, ver. 3.0 „pomoću jednog i mnogovariantnogoanaliza, podskupine analiza (analiza podgrupe), usporedbu dva uzorka (parametara i neparametrijskim), te se faktor poshagovyyanaliz (p <0,05, F za unos = 4).

Rezultati istraživanja

Nađeno je da se u razdoblju od pogoršanja (tablica 1) u bolesnika sa značajnim promjenama HTnablyudayutsya immunologicheskihpokazateley proučavali (Tablice X - srednja veličina, d - standartnoeotklonenie).

Tablica 1. Neki pokazatelji imunološkog statusa na bolnyhhronicheskim toksoplazmoza tijekom akutne bolesti

* - p<0,05, ** - p<0,01 (сравнение с контрольной группой).

Dakle, unatoč nedostatku pouzdanih statističkih razlichiyu bolesnika s cikličkim tijeku bolesti u usporedbi s rekurentnim, isprva primijetio značajno veći sadržaj CD-8 + neskolkobolshee broj B-limfocita koji proizvode Ig G (u daljnjem tekstu - B-IgG +). Također povećava koncentraciju specifičnog Ig G (u daljnjem tekstu Ig G Tox), IFN-čin, IFN-acti IL-4. Također primjećuje odsutnost lučenjeg-akt, niža koncentracija IFNg-Društvo ipokazatelya RTML.

U usporedbi s pokazateljima imunološkog statusa sa formeHT latentnog razdoblja pogoršanja (ponovnom) tijekom cikličkog harakterizuetsyastatisticheski značajan porast količine CD-8 + IFN-akt (p<0,05), снижением количества B-Ig G+ (p<0,05), общегоIFN-g (p<0,01) и Ig G tox (p>0,05), а также ростоминдекса РТМЛ (на 15 %). У пациентов данной группы не обнаруживалсяв сыворотке крови активный IFN-g (как и при латентном токсоплазмозе).

Imunološki sustav kod akutnih bolesnika sretsidiviruyuschim tijek kemoterapije je karakteriziran manji broj vyrazhennymuvelicheniem CD-8 (p +<0,05) и активного IFN-акт (p>0,05),более заметным снижением количества B-Ig G+, Ig G tox, IFN--akt (p<0,05), наличием в сыворотке IFN-g-akt, oštar pad u IL-4 i RTML rasta od 28%.

Tablica 2. Neki pokazatelji imunološkog statusa na bolnyhhronicheskim toksoplazmoza nakon tretmana toksoplazminom

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Tablica 3. Neki pokazatelji imunološkog statusa toksoplazmoza bolnyhhronicheskim 1 mjesec nakon tretmana.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ).

Tablica 4. Neki pokazatelji imunološkog stanja na bolnyhhronicheskim toksoplazmoza 3-6 mjeseci nakon tretmana.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Analiza podataka u tablicama 2-4 pokazuje da je, zajedno s uobičajenim skupinama bolesnika dlyaobeih HT mijenja imunološki sustav nablyudalissuschestvennye proučavao razlike u dinamici pokazatelja narastayuschievo vrijeme.

Odmah nakon imunološkoj u svim patsientovnablyudali rast IFNg-akt, IL-4 (boleevyrazhenny pod cikličkim tijeku bolesti), redukcija CD-4 + 8 + -iCD. Međutim, ako je ciklus tijek bolesti CD-4 + snizhalisna 5%, CD-8 + - 11%, kada je povratna naravno trend zaregistrirovanaobratnaya: CD-4 + se smanjiti za 25%, i CD-8 + - 10% dužnici promjene su uz višesmjernog dinamika IFN-g-društva: njegova koncentracija je porasla za 85% u pritsiklicheskom HT i smanjen je za 38% u pacijenata s retsidiviruyuscheyformoy bolesti.

Unutar mjesec dana pacijenti studirao grupne dinamike pokazateleyIS steći više razlike. U cikličkom bolezniprodolzhalsya protoka lica (40-120%), povećanje koncentracija IFN-g-IFN i djelujug-Društvo, vozrastalokolichestvo CD-4 + za vrijednost prelazi razdoblje od pogoršanja, nablyudalosdalneyshee smanjenje broja CD-8 +, pokazala je smanjenje IL-4. U isto vrijeme, u bolesnika s relaps rast kemoterapija CD-4 + popraćeno sa značajnim porastom CD-8 + (30%). Neznachitelnyyrost koncentracija IFN-g-ukupno (1%) ovih bolesnika bila je povezana s uvelicheniemkontsentratsii „aktivnih” oblika IFN (njihovu vrijednost povećana za 10%).

Bolesnici obiju skupina opažena je jednosmjerni dinamikakontsentratsy B-Ig G + i Ig G tox (smanjenje broja limfocita, produtsiruyuschihIg G i koncentracija specifičnih imunoglobulina).

Posebno valja istaknuti su rezultati složene (klinički i imunološke) pregled bolesnika u roku od 3-6 mjeseci nakon tretmana.

Istraživanje rezultira Bolesnici manifestiraju oblike HT cherez6 mjeseci tijekom liječenja pokazuju da

1. Kada biciklizam tijek bolesti (jednokratno Naravno terapiiprivodit stabilnu remisiju bolesti - prelazak bolesti vhronicheskuyu latentnom obliku), postoji gotovo potpuno klinicheskayaremissiya - nestati pritužbe manifestacije poraz retikuloendotelialnoysistemy tijela oporavila socijalnu adaptaciju pacijenata.
2. Dinamika kliničkih manifestacija kemoterapije izravno korelira s rostomCD-4 +, IFNg-čin (pozitivno) i indeks vyrazhennymsnizheniem RTML s toksoplazminom (negativno). RostuCD-4 + odgovara proporcionalnog povećanja količine CD-8 +, povećava koncentraciju Ig G Tox. Većina studirao immunologicheskihpokazateley ne razlikuje od one u latentnom obliku kemoterapije.
3. Povratna naravno očituje oblika HT u ovim uvjetima obsledovaniyaharakterizuetsya zadržavanje disadaptative reakcije (smanjuje radna sposobnost izražen emocionalnu nestabilnost, postoje objektivni priznakiotsutstviya remisija) oštar porast u broju CD-8 + povtornymuvelicheniem indeks RTML antigena toxoplasma, snizheniemkontsentratsii Ig G Tox, niske koncentracije aktivne interferona ,

rasprava

Istraživanja su pokazala da imunološki procesi koji pridonose kliničkih manifestacija reaktivacija kemoterapije harakterizuyutsyaopredelennymi razlika u bolesnika s uporni polozhitelnymeffektom imunološki i bolesnika s relaps oblike dannoyklinicheskoy bolesti.

U suradnji s podacima dostupnim na datum, literaturi, rezultati vlastitog istraživanja omogućuju nam da nudimo obyasnenienekotoryh manifestacija infekcije stečene toksoplazmoza.

Poznato je da je glavni element latentnogotoksoplazmoza spriječiti ponovnu je sinteza visokih razina IFN-g, koji sprečava razgradnju ciste. To yavlenieizucheno eksperimenti [6]. Također se pokazalo da kada latentnomtoksoplazmoze specifična CD-4 + lučiti i lučenjeg,i IL-4, što je karakteristika Th0 stanica [9].

U nekim studijama eksperimentalno je dokazano da infitsirovaniemakrofagov Toxoplasma dovodi do smanjenja ekspresije MHC-II molekulklassa i IFN-g-ovisne prezentacije MHC-I, mozhetyavlyatsya da je jedan od faktora koji određuju upornost vozbuditelya.Takzhe pokazuje da reaktivacija latentne infekcije u eksperimentevazhnaya uloga igrati CD-8 +, koji lizira infitsirovannuyukletku, ali ne unište sami Toxoplasma [4,8].

HT oštrenje mehanizam može se prikazati kao što slijedi obrazom.Na razvijanje pozadina imunosupresija smanjenu koncentraciju IFNg(Kao rezultat izravnog inhibicijskog djelovanja ili sinteze rezultateistoscheniya). Smanjene IFN-g mogu dovesti do pretvorbe u spetsificheskihTh0 Th2, što dovodi do vrha citolizom stanica infitsirovannyhtoksoplazmami (pseudocista). Dolazni ekstracelularno prostranstvoparazity djelomično lizirane specifična antitijela u prisutstviekomplementa. Dio patogena podvrgnuti fagocitozu, nosyaschemunezavershenny karaktera. Unutar patogena oblika sobstvennuyuobolochku stanice, inhibira funkciju antigen-predstavljanja, a time i stvara uvjete za njegovo očuvanje, jer, čak i na stanicama sluchaelizisa on ostaje živ. Ovaj proces podržan zaschet kronični nedostatak lučenjeg. Mogući reverzibilnost Uvjeta imunodeficijencije spontane remisije, ako je koncentracija IFNg povećanje, iimmunny odgovor će provoditi Th1-tip. U slučaju uglubleniyaimmunodefitsita (AIDS) Th1-kontrole je potpuno izgubljen, zaštita funktsiyunespetsificheskoy pretpostaviti neutrofili i aktiviruetsyaTh2 odgovor. Kao rezultat toga, razvoj poliklonalnog aktivaciju B-limfotsitovs hiperprodukcija nespecifične antitijela, što dovodi do razvojnoj generalizatsiiinfektsii parazitskih sepse (meningoencefalitis, apscesa, upale pluća, hepatitis, miokarditis, i sl).

U većini slučajeva (90%) toksoplazminom služi kao spetsificheskogoimmunomodulyatora, čiji mehanizam djelovanja vjerojatno svyazans aktivacija proizvode IFN-g određenu CD-4 +. U ovom mehanizmasvidetelstvuyut pogoduju rastu CD-4 + i koncentracija IFNg,i nepostojanje značajnih dinamike humoralnog zvenaimmuniteta. Antigen je intradermalno vjerojatno sorbiruetsyana stanica kože, obrađene i predstavlyaetsyaya-helper stanice koje reagiraju na IFN-it generacije g dopolnitelnogokolichestva antigen. S druge strane, IFNgstimulirane Th0 transformacija u Th1. Tako prekraschaetsyatsitoliz stanice inficirane sa pseudocista već formirani, i u odsutnosti potonji se nalazi unutar stanice aktivirane toksoplazmyunichtozhayutsya IFNg makrofagi.

Oko 10% slučajeva ne rezultira uvođenjem toksoplazminom krazvitiyu stabilna remisija. Relativno visoka početna urovniIFN-g (Uključujući aktivni IFN-g), mogu se odnositi na činjenicu da su ti pacijenti otsutstvuettochka njegove primjene (ne eksprimiraju receptor). Snizheniekolichestva CD-4 i IFN +g dopolnitelnoyantigennoy na pozadini opterećenja, naknadno rast CD-8 + hronicheskihvirusnyh tipičnih za infekciju (npr hepatitis). Međutim, ovaj slučaj je nepotpun karakter citoliza i mikrobitsidnayaaktivnost makrofagi, vjerojatno se ne povećava.

Sposobnost imunih stanica na sintezu IFN-g pod utjecajem specifičnih antigena stimulyatsiiopredelyaet i predvidjeti daljnji tijek kemoterapije. Ispostavilo se da je uvseh bez iznimke, bolesnika s cikličkim tijeku bolesti, 4 tjedna nakon tretmana, razinu ukupnog toksoplazminom lučenjegpremašila original, dok je u recidivu HTV-u to vrijeme koncentracije ukupnog IFNg80% pacijenata smanjen.

Očito je da interferon ima važnu ulogu u procesu reaktivatsiilatentnogo toksoplazmoza. Mehanizam relapsa kemoterapije, vjerojatno teže, kao što pokazuje korelaciju dinamike kliničkih pokazatelja proyavleniys RTML sa Toxoplasma antigena. RTML yavlyaetsyaintegrativnym indeks odražava immunokompetentnyhkletok interakciju s citokina koje proizvode da ih ima mnogoobraznymiodno- i višesmjernog biološke učinke. Jasno polozhitelnayadinamika bolesnika sa stabilnom bolešću u prijelazni remissiyui ponovne pojave simptoma akutne druge kategoriipatsientov podudara s vremenom očite razlike pokazatelyaRTML. Nakon 3-6 mjeseci nakon tretmana, sensibilizatsiisnizhaetsya u prvoj skupini i povećava u sekundi.

nalazi

1. U patogenezi akutne egzacerbacije kroničnog toksoplazmoza chelovekaodnim od vodećih faktora za smanjenje razine IFN-g i pripadajućeg aktiviranje Th2-odgovora.
2. U 90% dodatnog opterećenja s antigenom vnutrikozhnomvvedenii toksoplazminom dovodi do stimulacije IFNg,mikrobicidno aktivaciju makrofaga mehanizmi prestanak tsitotoksicheskiheffektov, obnoviti toleranciju i transformacija zabolevaniyav latentni oblik putem uključivanja Th1-odgovora.
3. Značajno manje (10%) od antigena nagruzkane dovodi do uključivanja Th1-odgovora, koji može biti svyazanos genetskim defektima kao IFN-g proizvodnje, i mehanizama za njegovu provedbu biologicheskiheffektov.
4. Toksoplazminom (Toxoplasma antigen kompleks) je spetsificheskimimmunomodulyatorom, glavni mehanizam djelovanja je stimulacija sinteze svyazanso IFN-g proliferacije antigen-specifičnih T-helperov1 prvog tipa.

reference

1. Lobzin JV, Bulankov Yu Kazantsev AP, Vasiliev V.V.Hronichesky toksoplazmoza: racionalna terapija. / Rossiyskiemeditsinskie olovo. Znanstveni časopis za klinitsistov.- 1997. - N 2.- t 2 -. S. 67-69
2. Beazley D.M., Egerman R. S. Toksoplazmoza // Semin. Perinatol.-1998. -Vol. 22. 4. № -P. 332-8.
3. Bossi P., Caumes E., Astagneau P. Li T.S., Pariz L., MengualX., Katlama C., F. Bricaire Caracteristiques epidemiologiquesdes toxoplasmoses cerebrales Chez 399 pacijenata infectes parle VIH suivis entre 1983 i 1994 / Rev. Med. Interne.-1998 svibanj--Vol.19, №5. -P. 313-7
4. Darrel O., Ho-Yen, Alex W.L. Joss. Ljudski toksoplazmoza. -Novi-York University Press, 1992. - 432 str.
5. Denkers E.Y., Gazzinelli sobna temp Regulacija i funkcije T-stanica za vrijeme mediatedimmunity Toxoplasma gondii / Clin. Microbiol.Rev. -1998. -Vol. 11. №4. -P. 569-88
6. Hunter C.A., Subauste C.S., Remington J.S. Uloga cytokinesin toksoplazmoza / bioterapija. -1994., -Vol.7, №№3-4. -P. 237-47
7. Isaac-Renton J. Bowie W. R. King A. Irwin G. S., Ong C.S., Fung C. P. Shokeir M.O., Dubey P. Otkrivanje Toxoplasma gondii oocysts u vodi za piće / Appl.Environ. Microhiol. -1998. -Vol.64, №6. -P. 2278-80
8. Luder C. G., T. Lang, Beuerle B., Gross U. Down-regulationof MHC klase II molekula i nemogućnost regulacije klasi molekula u mišjih makrofaga nakon infekcije Toxoplasma gondii / Clin. Exp. Immunol. -1998., Sv. 112, №2. -P. 308-16
9. Prigione I., Facchetti P., Ghiotto F., Tasso P., Pistoia V.Toxoplasma gondii-specifične CD4 + T-stanični klonovi iz zdravih latentno inficiranih ljudi pokazuju Th0 profil izlučivanja citokina / Eur. J. Immunol. -1995. -Vol. 25. №5. -P. 1298-305