Onkologiya-

EV Fleishman

Ruski onkološki Znanstveni centar nazvan po NN RAMS, Moskva

izvor RosOncoWeb.Ru

Povratak u kasnim 80-ih - ranih 90-ih, zaključeno je da chtohromosomny analiza je jedna od najvažnijih prognostičkim metodovpri nelimfoblastnyh akutne leukemije (ONLL). Ovaj zaključak podtverzhdendannymi velike multicentrično studija zadnju godinu (Grimwade i sur., 1998- Kern i sur, 2000.-slovački i sur, 2000, Visaniet sur., 2001).

Ovaj izvještaj je posvećena mogućnostima tsitogeneticheskogoanaliza i svoje mjesto među ostalim prognostičkim kriterijima. Predstavlenobzor literatura i vlastitih podataka, poluchennyev citogenetika laboratorij RCRC od ovnova usko svrachami hematoloških oba odjeljka Cancer Center i druge klinike Moskvi (355 slučajeva ONLL).

Promjene kariotip karakterističan ONLL, mogu se podijeliti u tri skupine ovisno o njihovoj prognostičku vrijednost. Pervayagruppa su kromosomske abnormalnosti, Foretelling dobar terapijski odgovor, to je udio bolesnika s bolesti bez 5-godišnje vyzhivaemostyusostavlyaet 60-70%. U skupini s lošom prognozom je indikativno da prelazi 10-15%. Ostale promjene kariotipu acsotsiirovanys "srednji" odgovor na liječenje (Grimwade et al., 1998). Prognostička vrijednost jednog kromosoma anomaliymozhno samo određuje usporedbom skupina bolesnika liječenih poluchavshihodinakovoe. Na primjer, bili tretirani prema protokolu na Odjelu za detskoygematologii našem centru, 16 djece s prognostički blagopriyatnoyhromosomnoy translokacije t 1991 (8-21)"7 + 3"I nakon 1991. godine, 12 djece s istim anomalieypoluchili tretmana na modificiranom protokolu BFM-87. U podavlyayuschegobolshinstva pacijenata dobiva potpunu remisiju. Bezretsidivnaya5 godina stopa preživljavanja u prve skupine je 15,3 + 10%, i drugo - 58,3 + 20% (p = 0,03).

Odvajanje velike heterogene skupine akutne mijeloidne leykozovna tri prognostičke skupine prema osobennosteykariotipa predlaže oko 20 godina (Heim et Mitelman, 1995.) .Za proteklih godina, klasifikacija se promijenilo i dalje menyatsya.Eto zbog akumulacije novih znanja o kliničkim znacheniinesluchaynyh kromosomskih abnormalnosti.

U trenutku mijenjati kariotip, koji ima vrijednost blagopriyatnoeprognosticheskoe uključuju kromosomske translokacijski t (8-21) (q22-q22), t (15-17) (q22-q21), t (16-16) (p13-q22), i inverzija kromosoma 16 -inv (16) (p13-q22). Skupina citogenetička mijenja imeyuschihneblagopriyatnoe prognostički značaja uključuju promjene dlinnogoplecha kromosomu 3q21 3 utječe na područja i / ili 3q26, utratyhromosom peti i sedmi parova, delecije dugog kraka hromosomy5 translokacije, t (6-9) (P23-Q34) i t (9 -22) (Q34-P13), razlichnyeperestroyki kratkom kraku kromosoma 17, a složeni promjene kariotipu odnosno leukemija s tri ili više kromosomskih aberacija. Vseostalnye slučajevi spadaju u srednji prognozu skupine. Ostanovimsyana neke nove podatke koji su važni za kliničku praksu.

Većina stranih klinika i multicentrično issledovaniyahvse promjene u kromosomske regije 11q23 iz prognosticheskineblagopriyatnym. Poznato je da su promjene u ovom području su vrlo raznolike, što je opisano u određenom kromosomske regije 11q23 izgon boleechem 40 različitih područja u kariotipa. Svaka od tih anomalija, iako je citogenetski homogena skupina može zatragivatraznye gene, a to dovodi do razlike u osjetljivosti khimiopreparatam.

Citogenetičke promjene, gledajući u svjetlo mikroskopiiabsolyutno jednaki, različiti ako je pronađena njihova izucheniyaispolzuyutsya molekularne genetičkim tehnikama, kao što je fluorestsentnayain situ hibridizacije (FISH), i lančanom reakcijom polimeraze (PCR) .With ove metode kad postoje razne ONLL eschebolee genetska varijacija nego što je obnaruzhenopri standardni analiza kromosoma. Do danas nakopilisfakty koji ne dopuštaju da uključuje sve promjene u regiji 11q23 gruppuprognosticheski nepovoljna abnormalnosti kariotipa. Već serediny90 je objavio niz zapažanja pokazuju horoshemeffekte liječenje leukemije s translokacije t (9-11) (Mrozek i sur, 1997, Swansbury i sur, 1998- Pui i sur, 2000 ..): Petogodišnji vyzhivaemostsostavila 60-70 %, odnosno je jednaka kao i u skupini abnormalni kariotip prognosticheskiblagopriyatnymi.

Nedavni međunarodne studije multi-centar, vklyuchayuschiebolshie serija (stotine slučajeva) tretirani jednako ONLL, pozvolilipridti zaključiti da je prognoza ONLL s pregradnje vovlekayuschimirayon 11q23, određuje ne samo genima lokaliziranih vetom područje, ali i drugi član izgon.

Jedan primjer - translokacija t (10-11) (p12-13-P23). To je anomalija ochenredkaya (1-2% ONLL). Većina patsientovs translokacije t (9-11) (P22-P23) i t (10-11) (p12-13-P23) jedan od: gena koji sudjeluju mLL gen. Kada translokacije t (9-11) poznat je samo jedan gen moguće partner mLL uključuje kotorogovoznikaet kondenzirani (kimerno, hibridni gen). U isto vrijeme molekulske geneticheskoeizuchenie translokacije t (10-11) (p12-13-P23) pronađen na 4 gena.Eto gena mLL i mirno, lokalizirane u području 11q23, te geni AF10i ABI1 u 10p12-13 lokalizirano područje. Podaci o dlitelnostizhizni leukemije s kromosomske translokacije t (10-11) sve dok vesmanemnogochislenny. U literaturi postoje dokazi manje od oko 100 pacijenata koji su primali drugačiji tretman. Pažnje veliki opstanak variabelnostpokazateley: neki pacijenti povrat dogodio navtorom mjeseca od početka remisije, dok su drugi preživjeli 5 godina. Molekularna ne geneticheskieissledovaniya uvijek provodi, međutim, čini se da kimerni gen ABI1-MLL povezan sa blagopriyatnymprognozom znatno više od ostalih himernih gena koji proizlaze iz translokatsiit (10-11) (Shibuya i sur., 2001).

Sljedeće pitanje koje se mora raspravljati, zabrinutost geterogennostiprognosticheskih skupina odabranih na temelju karakteristika kariotipa, a posebno, skupina s povoljnom prognozom. Poznato je da 5-godišnje preživljavanje u ovoj skupini bolesnika je 60-70% .Before početku liječenja ili tijekom razdoblja od kliničkih i hematoloških remissiinevozmozhno točno predvidjeti tko će pasti u 60-70%, au kogorazovetsya početkom recidiva. Međutim, mnogi poznati klinicheskihpokazateley povezana s lošijim prognozama, naime boleechastym razvoj ranog recidiva u ONLL. Među takvim pokazateleysleduet navedeno ekspresiju CD56 antigena u stanicama blast, nedovoljna smanjenje broja stanica u visokim kostnommozge na 14-21 dana liječenja, dodatnih abnormalnosti kariotipa, visoka leukocitoza u dijagnostici (Schoch et al, 1996. Baer et al., 1997 Daniels et dr., 1999- Peniket et al., 1999- Ferrara i sur., 2000). Također postoje izvještaji da znaci rezidualne displazija (neleykoznogo) stanica eritroidnogoi koštane srži megakariocitičnih klice prije tretmana predveschayutnevysokuyu ONLL učinkovitosti u de novo (Tamura i sur., 1998- Lemez i sur., 2000). Odnosi li se to na leukemije blagopriyatnoyprognosticheskoy grupe još nije jasno. Identificirati svaki sluchaeOML prognostički negativne simptome na pozornici postanovkidiagnoza mogu biti korisni za optimizaciju protokola liječenja.

Individualni prognoza, postoji opasnost od recidiva i pojave vremyaego pojedinog pacijenta ONLL nemoguće je procijeniti bez provođenja molekularnu praćenje minimalne ostatne bolesti (MRD). Stanice leukemije, preživjeli unatoč primenenietsitostaticheskoy terapije i uporni tijekom pun klinički i gematologicheskoyremissii čine biološki minimum podloge rezidualnoybolezni. Te stanice nisu otkriveni u kliničkim pokusima krvi koštane srži, ali otkriti primjenom chuvstvitelnyhmetodov, među kojima je prvo mjesto tsepnayareaktsiya polimeraze s reverznom transkripcijom (RT-PCR). Postavite tesnayasvyaz MRD s prognozom. Pokazano je da je učestalost retsidivovznachitelno veća u bolesnika u kojih se ne otkrivaju minimalnuyurezidualnuyu bolesti u usporedbi s bolesnicima gdje MRBne otkrivene. Nadalje, utvrđeno je da su više kolichestvoostavshihsya stanice leukemije, manje vremena od početka pojavu relapsa remissiido (Radich, 2000). Novi kvantitativni metodikiPTsR dopustiti MRD praćenje je bolje nego kachestvennyemodifikatsii (Tobal et al, 2000). Novi koncepti "molekulyarnayaremissiya" i "molekularna povratak", Prikazani chtopri postizanje remisije javlja znachitelnoesnizhenie razinu kimernog gena transkriptu. Tijekom gematologicheskoyremissii odrediti stalnu nisku ekspresiju kimernog transkriptaili PCR-negativnosti, to jest, postoji molekularna remissiya.Za 4-6 mjeseci prije pravog stopa recidiva suschestvennopovyshaetsya prijepis, odnosno, tu je molekularni relapsa.

Translokacije t (8-21) (q22-q22), - jedna od najčešćih kariotipsku spetsificheskihanomaly na ONLL. To je primijetio u 20% slučajeva u vzroslyhi 40% djece s M2 opciju. U ovom translokacije rezultatesliyaniya fragmenata dva gena - AML1 i ETO oblikovan himernyygen AML1-ETO. Kimerni gen, ili transkripta mogu obnaruzhens s PCR ili FISH svih bolesnika s t (8-21). U nekim se krije sluchayahtranslokatsiya: ona se može osjetiti u ne standartnomtsitogeneticheskom analizi, već samo pomoću PCR i FISH (Krauteret al, 1998.). Kimerni transkript tijekom translokacije t (8-21) obnaruzhivaetsyau većina bolesnika i tijekom produljenog remisiju (Nuciforaet al, 1993- Kusek et al., 1994). Prema tome, kachestvennayaPTsR nije pogodan za nadzor MrD u bolesnika s t (8-21). KolichestvennayaPTsR omogućuje procijeniti i predvidjeti učinkovitost liječenja gematologicheskiyretsidiv što nužno slijedi molekularnu recidiv (Tobal i sur., 1998). Nedavno objavljene studije u kojoj privodyatsyadannye da nestanak himerni prijepisa AML1-ETOv ishod liječenja sluti dugo u stabilnoj remisiji (Morschauseret al, 2000).

Akutne promijelocitne leukemije (APL, M3) skhromosomnoy blisko povezana translokacijski t (15-17) (q22-q21), koji je marker yavlyaetsyavazhneyshim dijagnostički akutne povrede pluća. Kao rezultat ovog translokatsiivoznikayut himernih gena PML-rara i rara -RML. Himerni transkriptyPML-rara i rara -RML su važni markeri za praćenje molekulyarnogodiagnoza i RFI (Grimwade i sur., 1997 Krauter i sur., 1998). Ha ogroman materijal (stotine pacijenata), pokazalo se da je nestanak kimcričnog prijepisa konsolidatsionnyhkursov nakon tretmana bio je popraćen početka hematološke remissii.Pri održavanje transkript, usprkos postizanju potpune gematologicheskoyremissii, potonji se ispostavilo da Ukratko: retsidivy.V primijetio ranije slučajeve u kojima se nakon razdoblja PCR negativnosti ( molekularna remisija) himerne transkript opet (molekularna relapsa otkriven), gotovo uvijek u roku od šest mjeseci razvili gematol ogicheskiyretsidiv (Diverio et al., 1998- Burnett et al, 1999). Opublikovanyneskolko uspješni pokušaji da se spriječi hematološki retsidivOPL, počevši tretman tijekom molekularne relapsa (Grimwade i sur., 1997 Diverio i sur., 1998). Posljednji od njih publikatsiy- vrlo ohrabrujuće: ponavljani molekularne remisije bylidostignuty u 12 od 14 bolesnika kao posljedica intenziviranja terapiivo vrijeme molekularne recidiva.

Skupina s povoljnim prognozom ONLL također uključuje leykozys pericentromeričke inverziju kromosoma 16 - Inv (16) (p13-q22) ilitranslokatsiey t (16-16) (p13-q22), što je rezultiralo voznikaethimerny gena CBFb-MYH11. Ove anomalije su promatrane u svim bolnyhs morfološku varijantu AML-M4Eo, oni su također otkrili 40% slučajeva AML-M4. Među svim slučajevima gdje je detektiran himernyygen CBFb-MYH11 samo polovica mijelomonocitna leukemija, u drugim slučajevima je dijagnosticiran M2, barem - M1 ili M5.Himerny prijepis CBFb-MYH11 kondenzirani gena, otkriven u vsehbolnyh pomoću PCR (Langabeer et al ,. 1997). Kinetika himernogotranskripta CBFb-MYH11 u tijeku bolesti studirao je gore nego drugihtranskriptov bolesnika u skupini s relativno ONLL blagopriyatnymprognozom. U većini slučajeva, pun ofenziva molekulyarnoyremissii zaostaje značajno iza uspostave punih gematologicheskoyremissii. Himerni transkript može se odrediti do 24months od početka remisije. Recidivi nablyudayutsyau Većina pacijenata čije transkript otkrije više od 6 monthsa od početka remisije (Martin i sur, 2000). Pojava nakon himernogotranskripta PCR negativnosti razdoblja tijekom remisije predveschaetpriblizhenie hematološki recidiv (Laczika i sur., 1998).

Naš istraživački tim provodi pacijenata molekularne monitoring26 s prognostički povoljnu kromosomskih anomaliyami.Rabota započete prije dvije godine. U jednom slučaju, 21 udalosprovesti od dva do šest PCR analiza. U ovom izvješću, mi ostanovimsyatolko na skupini pacijenata s podacima translokacije t (8-21) (10sluchaev). U 6. njima na isti način kao u većini opublikovannyhnablyudeny, pronašao očuvanje kimcričnog prijepis fonepolnoy remisije u trajanju od 3 do 24 mjeseci. 4 bolesnika vyyavlenaPTsR-negativnosti: u 2 od 3 bolesnika ispitivani tijekom dlitelnoyremissii (mBFM-87 protokol), te je u 2 od 4 - u ranim fazama programa liječenja otnachala AML 2000. možda razlog za rano (unutar 6 mjeseci od početka remisija) nestanak transkriptayavlyaetsya smanjuje broj stanica leukemije obuslovlennoevesma agresivan terapije. Daljnje promatranje pokazuje kakoeprognosticheskoe važnost nestanak prijepis AML1-ETOu našim pacijentima.

Sada smo uzimajući naše prve korake u korištenju jednog od modifikatsiytak zove konkurentnu RT-PCR za određivanje razine himernogotranskripta AML1-ETO u koštanoj srži i krvi bolesnika (kolichestvennyymetod). 6 osoba ispitanih. Potvrđeno literaturnyedannye smanjenja himerni prijepis nakon prvog terapevticheskihkursov (indukcija i konsolidacija). U dva bolesnika, obsledovannyhneskolko puta tijekom remisije, zafiksirovanopostepennoe smanjenje razine prijepisa. Promatranje prodolzhaetsya.Planiruetsya pojačavanje terapije nakon detekcije molekulyarnogoretsidiva.

Ovi podaci pokazuju da je potrebno nastaviti s tsitogeneticheskihissledovany ONLL pojasniti prognostičke znacheniyaotdelnyh kromosomske abnormalnosti, posebno, rijetke izmeneniykariotipa. Te studije nisu moguće bez korištenja molekularne geneticheskihmetodik. Velika nada se zabodena o monitoringu MRD kao perspektivnyymetod pojedinog prognozu.

reference:

1. Baer MR, Stewart CC, Lawrence D et al. Krv 1997, 90: 1643-1648.

2. Burnett AK, Grimwade D, E Solomon et al. Krv, 1999, 93: 4131-4143.

3. U Creutzig, Zimmerman M Kitter J et al. Br J Haematol. 1999.104: 630-639.

4. Diverio D, Rossi V, G Avvisati et al. Krv, 1998, 92: 784-789.

5. Grimwade D, P Gorman, Duprez E et al. Krv 1997, 90: 4876-4875.

6. Grimwade D, Walker H, F Oliver i sur. Krv 1998., 92: 2322-2333.

7. Ferrara F, Morabito F, Martino B.J et al. Clin Oncol. 2000,18: 1295-1300.

8. Heim S, Mitelman F. Cancer Citogenetika. Drugo izd., Wiley-Liss, 1995.

9. Kern W, Schoch c, Haferlach T et al. Leukemija 2000, 14: 226-231.

10. Krauter J, Paschberg B, Heinze B et al. Br J Haematol.1998,103: 72.

11. Kusek R, Laczika K, P Knobl et al. Leukemija 1994, 8: 735-739.

12. Laczika K, N Novak, Hilgarth B et al. Clin Oncol. 1998 16: 1519-1525.

13. Langabeer S, Walker H, Rogers HR i sur. Brit J Haematol.1997, 99: 925-928.

14. Lemez P, Galikova J, T Haas et al. Leuk Res 2000, 24: 207-15.

15. Martin G, E Barragan, Bolufer P et al. Haematologica 2000,85: 699-703.

16. Morschhauser F, Cayela JM, Martini S et al. J Clin Oncol.2000, 18 (4): 788-94.

17. Mrozek K, K Heinonen Lawrence D et al. Krv 1997, 90: 4532-38.

18. Nucifora G, Larson R, Rowley JD. Krv 1993, 82: 712-715.

19. Peniket AJ, Wainscoat JS, Wheatley K et al. Krv 1999- 94: 496a.

20. Radich JP. Curr Opin Oncol, 2000, 12 :. 36-40.

21. Schoch C, D Haase, Haferlach T et al. Leukemija 1996., 10: 1288-1295.

22. Slovačka ML, Kopecký KJ, Cassileth PA et al. Krv, 2000, 96: 4075-83.

23. Shibuya N, Taki T, Mugishima H et al. Geni Chrom Cancer2001, 32: 1-10.

24. Swansbury GJ, Slater R, Bain BJ et al. Leukemija 1998, 12: 792-800.

25. Tamura S, Y Takemoto, Wada H et al, 1998, Brit J Haematol.101 :. 743-748.

26. Tobal K, Liu Yin JA. Leuk limfom, 1998, 1-2: 115-120.

27. Tobal K et al. Krv, 2000, 95: 815-819.

28. Visani G, Bernasconi P, Boni M et al. Leukemija 2001,15: 903-909.