Genetski i rak imunoterapija

Dakle, sve veći interes za novim metodama viziranje (ciljane) terapije.

Genskom terapijom ostvariti prijenos genetskog materijala u terapijske svrhe u stanici, tkivu ili organu u kojem se materijal počinje izraziti određeni genski produkt.

u području tehnologije rekombinantne DNA napredak omogućiti nove spoznaje na rast ljudskih stanica, mehanizmi njegove regulacije i njegova povreda tijekom procesa tumora.

Za uspješnu gensku terapiju zahtijeva sljedeće:

• identificirati i izolirati funkcioniranje gen, koji poslije unošenja u stanicu, tkivo ili organ se uklonili genetski poremećaj;
• razviti postupak dostave gena u stanicu;
• moći kontrolirati ekspresiju uvedenog gena.

Unatoč činjenici da je svijet učinio više od 600 klinički

Studije na gensku terapiju, a većina njih predstavlja faze I i II kliničkih ispitivanja. Trenutno je službeno isključivalo za kliničku primjenu genske terapije tehnika. U Velikoj Britaniji, ovaj problem upravlja Savjetodavnog odbora za gensku terapiju. Kao i kod drugih novih terapija, gensku terapiju dok pokušava bolesnika s uznapredovalim stadijima raka. Međutim, u budućnosti, očito, njegova uloga je posebno značajna u liječenju raka u ranoj fazi, ili nakon kirurškog uklanjanja tumora (tj, ona se primjenjuje kao pomoćna terapija).

Trenutno u metodama razvoja u području genske terapije, dijelom također koristi u raka imunoterapija koja donosi ta dva trenda u jednom - rak TmmunoGene.

Imunoterapija se temelji na utjecaju na imunološke mehanizme razvoja malignih tumora. Ovaj efekt je usmjeren i na povećanje aktivnog imuniteta, kao i stvaranje pasivni biološkim agensima.

Imunoterapija može biti od dvije vrste:

• nespecifično;
• specifični - upotrebom lijekova koji se vežu za antigene tumora.

Ideja o stvaranju cjepiva protiv raka nije nova. Ona se prvi put pojavio u periodu kada je pokazao ulogu infekcije u početku razvoja nekih tumora:

• VLCH - rak grlića maternice;
• HBV - hepatocelularni karcinom;
• VEB - Burkittov limfom i nazofarinksa karcinom.

Tada je predložio da cjepivo protiv određenih tumorskih antigena pojavljuju se liječi i tumore, od kojih su zarazni priroda nije dokazano. Prednost ove metode liječenja bi moguće generirati specifični imunološki odgovor nakon uvođenja genetskih čimbenika koji su bili podvrgnuti pojačanje i zatim širenje djelovanjem na tumorskim stanicama u udaljenim dijelovima tijela. Većina modernih „istraživanja genske terapije pomoću immunogenetic metode.

Pristupi genskoj terapiji raka

Somatske korekcija defekt gena:

• Ekspresija gena supresor rasta tumora;
• Izraz prekid mugantnogo onkogen antisense oligonukleotid.

Genetska aktiviranje predlijeka.

Genetska imunološko:

• nespecifična imunoterapija;
• specifična imunoterapija.

Korekcija somatski defekt gena

Ekspresija gena supresor rasta tumora

Supresorski geni rast tumora u karcinogeneze gube svoju funkciju. Potpuni gubitak potiskivanje funkcije Pokretanje potiče rast tumora ili napredovanje tumora odvija samo u inaktivacije oba alela od gena. Na primjer, p53 gen kodira nuklearni protein koji djeluje kao faktor transkripcije, blokiranjem progresije tumora. Približno 50% ljudskih tumorskih stanica karcinoma otkriva mutantni p53 protein, je izgubila svoju funkciju. Mutacije mogu biti naslijeđena ili stečena. K gena, tumor supresor gena uključuju RB1 (retinoblastom) i E-kadherin.

Video: Novi non-virusnih gena lijek za rak

Eksperimenti modela tumora u in vivo genske zamjene mutant suzbijanje tumora normalnim kopija gena preko virusnih vektora dovodi do supresije rasta tumora i obnove normalan fenotip. Međutim, prijenos ovih preliminarnih nalaza u kliniku nije dao ohrabrujuće rezultate. U fazi I i II kliničkih ispitivanja u NSCLC bolesnika s p53 gena mutacije uvođenja retrovirusnih tumora vektor s divljim tipom p53 nije dao učinak. Tu je razlog da vjeruju da je uspješno korekcije gena p53 u kombinaciji s kemoterapijom, kao što su cisplatin, mozhrt smanjuju ekspresiju u stanicama tumora toj liniji.

Izraz prekida mutaitmogo onkogen antisense oligonukleotida

Protoonkogena - gena koji se aktiviraju u procesu karcinogeneze. Produkt gena je protein (npr, faktor rasta ili faktor transkripcije), koji igra važnu ulogu u regulaciji stanične proliferacije. Zbog kršenja normalnu regulaciju stanične diobe, proto dovoljno mutacije (nasljedne ili stečene) je samo jedan primjerak. Antisens DNA oligonukleotidi kratke nukleotidne sekvence sinteze koje su komplementarne određene sekvencije DNA ili RNA koje su dizajnirane za odvajanje onkogena. Uporaba antisense nukleotida oligonite-- inhibiciju transkripcije ili translacije mRNA proteina mRNA. To ograničava na ekspresiju gena i time formiranje genskog produkta.

Stoga, bcl-2 onkogena koji ima ulogu u razvoju raka prostate otpornog na hormonalnu terapiju. Ekspresija bcl-2 gena doprinosi tumora struci. Prekomjerna ekspresija bcl-2 stanicama uzrokuje otpornost na apoptozu. Ovaj gen je meta G3139 antisens molekule. Lijek oblimersen (genasens), nastao na temelju oligonukleotida, trenutno nalazi u kliničkim ispitivanjima u bolesnika s uznapredovalim karcinomom prostate. Drugi primjer antisens oligonukleotida prolaznim pokusa služi ISIS 3521 (affinitak), njegov ciljani - tirozin kinaze ne-receptorskog tipa. koji gustoća povećava kada se nekoliko solidnih tumora, uključujući NSCLC.

Gen aktiviranje prolijekova

Glavni nedostatak moderne kemoterapije - nedostatak selektivnost djelovanja. Kako bi se povećala selektivnost pomoću načina prijenosa gena. Ciljanje obuhvaća sljedeće korake.

• Gen kodira enzim koji aktivira lijek, je smještena u tumorskim stanicama.
• Nakon toga, redovito daje prolijek.
• Aktivirajući enzim pretvara prolijeka u toksičnog metabolita
• Tumorskih stanica umire zbog slijedećim modifikacijama: lokalno stvaranje metabolita- citotoksični učinak takozvanog „svjedok”, u kojem ne-transgenska stanica, dok je u miješanoj populaciji stanica ubijene u prisutnosti predlijeka difuzijom potonjeg, i uključujući aktivni transport lokalni imunološki mogu pronaći odgovor osigurati učinkovitost metode, čak iu nedostatku visoko učinkovit prijenos gena.

Svrha postupka prijenosa gena, - maksimalan broj uništava tumorske stanice, dok smanjenje sustavne toksičnosti.

Metoda je poznata pod različitim imenima:

• Aktivacija predlijek genska terapija (GPAT - genetski predlijek aktiviranje terapija);
• Gen regulacija enzimskog sustava predlijeka (GDEPT - gen usmjerenom cnzimska sustav);
• Terapija se temelji na regulaciji enzima predlijeka preko virusnih vektora (VDEPT- virus usmjerenom cnzimska terapija), prijenos gena pomoću virusni vektori;
• suicidalne genske terapije.

Glavni nedostaci postupka aktivacije gena prolijekova su:

• nedovoljno učinkovit prijenos gena u stanice tumora povezanih s nesavršenosti postojećih vektora;
• potreba za direktnim intratumoralno injekcije gena, u kojem je učinak nije često, ali samo vrlo ograničenu oteklina.

Video: Gordon №172 Rak Imunoterapija

Trenutno, studije su dizajnirani kako bi odgovorili na pitanje je li ennaya aktiviranje predlijekova da se preselio iz područja teorije u praksu, još nisu završeni. Jedan prototip cnzimska sustav se aktivira gen je bakterijska nitroreductase. Pretvara predlijeka SV1954 (može se primijeniti intravenski ili intraperitonealno, bez straha od komplikacija) u vrlo toksičnog alkiliranje nitrobenzamidin. Nitroreductase gen mogao biti uveden u tumor direktnim injektiranjem. Naknadno sistemska primjena predlijeka SV1954 dovesti ga gađenje u citotoksičnih nitrobenzamidin samo ako je gen umetnut u stanični genom. Terapijska učinkovitost ove metode još nije dokazano, ali studije u bolesnika s rakom jetre je u tijeku.

gen imunološko

Ne-specifična imunoterapija

Svrha nespecifične imunoterapija - povećati imuni odgovor u cjelini, ali ne aktiviraju imunološki odgovor protiv određenog antigena. Pacijent je cijepljena tvari uzrokuje imunološku reakciju koja bi mogla zaustaviti ili usporiti rast tumora. Ranije studije su provedene sa BCG i citokina, kao što interferonom alfa i interleukin-2.

specifična imunoterapija

Razvoj brojne metode indukcije imunog odgovora na tumorske specifične antigene.

Antigeni cilj treba imati sljedeća svojstva:

• izražen samo u stanicama tumora, te u vrlo malim količinama u ostalim tkivima,
• izraženi kao stanica primarnog tumora i njegove metastaze stanica;
• ili prepoznat od strane imunološkog sustava na staničnoj površini, ili u obliku fragmenata koji se odnosi proteina glavnog histokompatibilnog kompleksa (MHC).

Sljedeći odjeljci istaknuti tijeku razvoja metoda indukcije specifičnih antitumorskih imunih odgovora.

Pripravci cijelih stanica tumora

Pojedinačne cjepivo za svakog pacijenta generiran na temelju materijala dobivenog iz vlastitog tumora, te se obično daju s pripremnom adjuvansom kao što su BCG.

Nema potrebe da se identificiraju specifične tumorske antigene.

Mogućnost dobivanja vysokoimmunogennyh cjepiva za kliničku uporabu je ograničen.

Poticanje rezultati cjepiva protiv tumora na malom skupinom bolesnika koji su imali operaciju za rak debelog crijeva. Cjepivo neznatno povećava trajanje razdoblja recidiva bez.

peptidne vakcine

Ako izolirati i identificirati antigen tumora, peptidi dobiveni iz antigena, može se koristiti kao elitopov za imunoterapiju. Stimulirati imunološki sustav može se koristiti sintetička epitope. Do sada testirani u klinici intradermalno ili potkožnom injekcijom, obično u kombinaciji s adjuvantom BCG imunološke. Dodatno povećava mogućnost davanja antigen za prepoznavanje imunološkog nadzora kroz tumor, a time i njegovu odbacivanja. Primjer specifičnog peptida tumor antigen, su trenutno u istraživanju je mucin. Je visoke molekularne težine glikoprotein eksprimiran na stanicama u mukozi gastrointestinalnog sustava. U velikom broju malignih bolesti, uključujući rak gušterače i debelog crijeva, kažu svoju ekspresiju. To još uvijek nije dovoljno dokaza za povezanost između imunološkog odgovora i kliničke koristi.

DNA cjepiva

Umjesto korištenja kao protein tumorskih antigena mogu se odabrati kao ciljnog gena, izraženo u bolesnika podvrgnutih tumor. To uključuje stvaranje rekombinantnog cjepiva DNK, naznačena time, da vektor se koristi za prijenos DNA kodira protein tumora. Predstavljanje antigenske proteina inducira humoralne i stanične imunosti. Što se ciljevi za DNA vakcine izabran slijedeće supstrate.

• Mutirani gen je tumor supresor 053. Prisutnost više od 50% pacijenata s rakom.
• Karcinoembrionski antigen - glikoproteina stanične membrane i njegove prekomjerna ekspresija je navedeno u većine pacijenata s rakom debelog crijeva. Obično niske razine ekspresije ovog antigena u nota stanica debelog crijeva i sluznice žučnog trakta. Gene. kodira karcinoembrionski antigen je umetnut u različite vektore za upotrebu kao cjepiva. Iako brojni klinički pokusi u fazama I i II potvrdio dobru podnošljivost DNA vakcina protiv karcinoembrionskim antigena, dokazi o njegovoj kliničkoj djelotvornosti nema
• MAGE-1 - fetalni genski produkt povezan s karcinomom dojke i melanoma.
• Protein Her-2 / neu - EGF receptora, intracelularna domena koji posjeduju aktivnost tirozin kinaze.

Nedostatak DNA vakcine - ograničen broj tumor-specifičnih antigena. Većina ciljnih antigena nisu strogo specifične za tumor i izraženi, doduše u manjim količinama po normalnim stanicama. cjepiva protiv raka još uvijek je potrebno proći kroz klinička ispitivanja.

Cijepljenje s dendritičke stanice

Utjecaj na imunološki sustav selektivno ciljati svoje protu-tumorsko tkivo, povezana je s brojnim poteškoćama. To je izuzetno važno odabrati odgovarajući antigen. Međutim, uspjeh ovisi o optimalnoj prikaz ovih antigena na imuni sustav. Potreba da se osigura učinkovito zastupanje dovela je do uvođenja dendritičke stanice s antigenima. Dendritičke stanice imaju izrazita sposobnost obrade i prezentacije antigena potrebna za razvoj osnovnog HLA ograničene imuniteta T stanica, pa je važno za infekcija, autoimunih bolesti i malignih tumora. Te stanice eksprimiraju veliki broj HLA molekula i drugim membranskim molekula. Nedavni napredak u tehnologiji omogućila istraživanje kultivirati in vitro dendritičke stanice iz prekursora iz krvi i koštane srži korištenjem ditokinov. Vi možemo uvesti egzogeni antigena u kultiviranim dendritskih stanica kao što su tumorske proteina, peptida ili RNA) ili genom koji kodira antigen tumora (preko načina fizičke prijenos ili virusnim vektorima). To je nada da se s istovremenom primjenom antigena pomoću dendritičke stanice maksimalno poboljšanje kasnije odgovor T stanica i na taj način poboljšati prepoznavanja tumora peptida. Međutim, dendritičke stanice teško kulture, a klinička ispitivanja provedena na datum, malo i asa su samo u ranoj fazi.

Video: 172 Rak Imunoterapija

isporuka gena

Za uspjeh genske terapije isporuku sustava potrebno je, kroz koji se lažno učinkovit prijenos gena, bez oštećenja ćelija. Postupci isporuke broj gena.

Fizikalne metode:

• Injekcija DNK u skeletnim mišićima uz korištenje uobičajenih štrcaljke i iglu;
• DNA prijenos putem liposoma;
• balistički transfekcija pomoću zlatnih mikročestica, obložene s plazmidnom DNK ( „genskog pištolja”).

Prednosti fizičke metode - praktičnost i sigurnost. Nedostaci uključuju nisku učinkovitost prijenosa gena i prijelazne prirode njegovog izražavanja.

Biološke metode kao što su prijenos putem:

• Bakterijski vektori;
• virusni vektori.

Prednost korištenja bioloških vektora koji je najučinkovitiji i stabilan način kako bi se osiguralo umetanje DNA u značajnom broju kpetok cilja. Nedostaci ove metode su složenost postupka i mogućnost stvaranja antitijela u domaćina za neutralizaciju.

Sistemska primjena gena spriječiti sljedeće čimbenike:

• Visoke frekvencije unakrsno imuna reakcija s antitijelima;
• visoko imunogene vektore.

Video: NyuVak. Rak imunoterapija tehnologija

Stoga, prijenos gena izvodi se postupak biološke lokalne injekcije.

Izbor vektora za prijenos DNA ovisi o cilju liječenja:

• za zamjenu gena je poželjno da se koriste visoke virusne vektore;
• za kratki učinak potrebnih za poticanje imunološkog odgovora ili senzibilizirajuće stanica za terapiju zračenjem može se koristiti liposomi.

Isporuka može biti jedna od slijedećih tipova:

• ex vivo - prijenos terapijskog gena u izolirane stanice tumora ili raka, koji se zatim reimplanted u organizmu domaćina;
• in vivo - isporuku gena u ciljne stanice, na temelju razlike u transkripciju specifičnih gena između tumora i normalnog kletkami- ova metoda za prijenos gena je manje učinkovita.