Mikrobiološki postupak za laboratorijske dijagnostike zaraznih bolesti

Po primitku rezultata inspekcije i uzimajući u obzir epidemiološku skup podataka konačna dijagnoza. U dijagnozi pokazuju nosological oblik šifra ICD-10, metoda potvrđivanja dijagnoze, ozbiljnost i tijek bolesti, stadiju bolesti, prisutnost popratnih bolesti i komplikacija, kao što su „tifusne (kulture u krvi), ozbiljnost bolesti, razdoblje razgara- komplikacija - intestinalni krovotechenie- prateće bolesti - dijabetesa ". Točne i detaljne dijagnoze određuje terapijski strategije.

U nekim slučajevima, kada je klinički podaci su nedostatni, a laboratorijski testovi ne dopuštaju da se utvrdi etiologiju bolesti, može se organiziraju sindromi dijagnozu (npr trovanje hranom, akutne respiratorne bolesti, SARS).

Laboratorijska istraživanja igraju važnu ulogu u dijagnostici zaraznih bolesti, imenovanje uzročnoj liječenja, provođenje praćenje učinkovitosti liječenja. proces specifične laboratorijske dijagnostike To se temelji na identifikaciji uzročnika i odgovor ljudskog tijela tijekom zarazne procesa. Sastoji se od tri faze: prikupljanje materijala, prijevoza i istraživanja u laboratoriju. Provođenjem svaku fazu stavljanja specifičnim zahtjevima o sukladnosti koja određuje učinkovitost laboratorijska dijagnostika. Zadatak liječnika ispravan izbor istraživačke metode i pravilno vrednovanje njezinih rezultata.

metode Laboratorij za dijagnostiku razlikuju u osjetljivost i specifičnost. Osjetljivost metode odražava vjerojatnost da je rezultat testa pozitivan, zaraženi pacijent, a određuje prema omjeru ukupnog broja pozitivnih rezultata u ukupnom broju zaraženih pacijenata. Što je veća osjetljivost, manja je vjerojatnost lažno negativnih rezultata. Kriterij specifičnosti odražava vjerojatnost da je rezultat testa će biti pozitivno u nezaraženih bolesnika, a izračunava se kao omjer ukupnog broja negativnih ishoda na ukupan broj ne-zaraženih pacijenata. Što manje specifičan, to je veća vjerojatnost lažno pozitivnih rezultata. Obje slike se izražava kao postotak.

Mikrobiološki dijagnostički postupak se temelji na detekciji patogena u biološkom materijalu. Koristite svjetlo optičkim i elektronskim mikroskopom.

Mikrobiološki postupak često koristi u dijagnostici zaraznih bolesti, bakterijske i protozojske etiologije, rijetko, virusnih bolesti.

U praksi bakteriološku laboratoriju mikroskopski pregled u većini slučajeva ima vrijednost koja pokazuje brzu dijagnozu. Glavni zadaci su mikroskopija otkrivanje patogena u kliničkim uzorcima, približan identifikacija na temelju određivanja karakteristične znakove morfoloških i bojom bakterije i ispitivanje obojenih razmaza čistih kultura iz kolonije.

Materijal za mikroskopskim pregledom može biti u krvi, koštane srži, cerebrospinalna tekućina, točkast limfnih čvorova, izmet, duodenalni sadržaj a žuč, urin, sputum, sekreti urogenitalnog trakta, tkiva uzetim biopsijom, razmazi iz sluznica usta, tonzile, nazalno i drugi.

Za otkrivanje „krvnih parazita”, na primjer od protozoa (Plasmodium malarijom, trypanosomes, lišmanije, Babesia) i (helminta microfilaria), testiranih lijekova „tankog testu” i / ili „gustim kap krvi”.

Lijek „debeli pad” pripravljen na dva načina:

Isušiti „debelu kap” treba postupno u zraku bez grijanja, pod njihovu zaštitu od oštećenja od insekata. obojani s krvi bez prethodne fiksiranja s Romanovsky-Giemsa.

za pripremu tanka premazati napraviti otisak u krvi blizu ruba slajd, a zatim rub kut od 45 ° se hrani da ispadne i izrezati staklo nakon krvi širi uz njezin rub kontinuirano gibanje distribuirati krv duž površine tobogana. Pripravak dobiven fiksirane i obojene.

Spinalna tekućina za ispitivanje mikrobiološke uzimaju u sterilnu epruvetu za lumbalne punkcije. Za dobivanje formulacije pomoću talog spontano ili centrifugiranjem.

Razmazi iz usne šupljine sluznice uzeti na prazan želudac ili s 2 sata nakon konzumacije sterilne štapićem obloženim vatom, bris-otisak se dobiva na staklenu ploču. Kad je posljednji filmska traka se uklanja sa sterilnim pinceta. Materijal iz šupljine nosa uzet sterilnom pamučnom krpom koji je uveden duboko u nosnoj šupljini. NP obrisak uzeti zadneglotochnym sterilnom se uvodi nježno kroz otvor u nosnu nazofarinksa. Za analizu difterije istražiti oba filma i sluzi iz nosa i grla. Materijal iz nosa i ždrijela poprimiti različite tampone.

Urin se skuplja za mikroskopski pregled u sterilnu posudu nakon pažljivog WC vanjskih genitalija. Za dobivanje formulacije pomoću urina talog.

mikroskopski pregled podvrgnu nativni (nefiksirana, neobojeno) i obojeni pripravci. U prvom slučaju otkriti žive mikroorganizme u proizvodu „visi kap” ili „kap slomiti” vrednovanjem pokretljivost i morfološka svojstva prema izvoru. Na primjer tamna polje mikroskopija izvornih pripravaka koji se koriste za dijagnozu spirochetosis (primarni, sifilisa leptospiroze, epidemijski (vshinogo) povratna groznica), kandidijaze ili drugih gljivičnih oboljenja. U tim slučajevima, rezultat mikroskopskog pregleda daje osnovu za dijagnozu.

Najkorišteniji mikroorganizama u boji mikroskopije stanju, naročito za dijagnozu parazitskih bolesti (malarija, amebiasis, giardijaza, lišmanijaze, helmintijaze). Za bojenje se koriste za referencu, posebne i razlikovanje metoda. Približna bojanje nam omogućuje procjenu ukupne morfologiju mikroorganizma. U tu svrhu, koristiti standardne boje - fuksin ili metilen plavo.

Među specifičnim metodama koje se koriste najčešće bojenje po Gramu. Ova metoda otkriva mogućnost bakterija koja omogućuje održavanje boje kristalno ljubičasto (ili gorčica ljubičasta) ili boju u alkoholu. Gram-pozitivne bakterije su obojeni ljubičasta, i Gram - crveno, kao što su discolor u alkoholu i dalje obojeni magenta. Sredstva za bojenje gram omogućuje definiranje primarni izbor sredstava antibiotske terapije.

Posebne metode za bojanje uključuju Ziehl-Nielsen, koja prikazuje kiselinu i alkohol-štapiće, posebno su Mycobacterium tuberculosis, koje su obojene u crveno, a preostale mikroorganizme - u plavo.

diferenciranje poziv metode bojanje pojedinih elemenata bakterijsku stanicu. Na primjer, za bojanje metahromatinovyh (volyutinovyh) uključaka u bakterije (kao Neisseria, Mayer), bojila (kapsule Giessen Leyfsonu Anthony), spore, flagele (po Leffler, Bailey, Gray i sur.), Cell zid kromatina (nuklearna) elementi (Romanowsky-Giemsa te Pekarsky).

Do mikroskopske metode istrage uključuju imunofluorescencija (Fluorescent mikroskopija) koristi se za dijagnosticiranje bakterijskih i virusnih infekcija, a temelji se na korištenju antitijela obilježenih s fluorescentnom bojom.

Učinkovitost mikroskopskim postupkom određuje njegova osjetljivosti i specifičnosti. Specifičnost ograničeno moguće pogrešne identifikacije sredstva zbog artefakata. Osim toga, tijekom mikroskopski pregled tehnika ima vrijednost istraživanja je, primjerice, u dijagnostici malarije krvi testira osjetljivost metode „debelog filma” 20-40 puta veća nego u studiji tankom testu, jer je ova droga omogućuje da vidite veći volumen krvi, a osim toga Plasmodium u proizvodu se nalaze izvan stanice kako bi se olakšalo njihovo otkrivanje i kvantifikacija.

Ipak, osjetljivost metode „debelog filma”, koje je proveo standardima WHO (studija od najmanje 100 poljima pogledom najmanje 5 minuta), ali ne prelazi 95% zbog nejednake raspodjele krvi malarije parazita, pogotovo na niskim razinama parasitaemia.

Važan način za poboljšanje osjetljivosti metode je korištenje mikrobioloških metoda različitih koncentracija patogena, kao što su taloženje ili flotacijom uzoraka stolice tijekom istraživanja i filtriranja kroz uzorke millipor filterske krv, urin, cerebrospinalna tekućina.

Poboljšati učinkovitost mikroskopskog pregleda otkrila olakšava kvantifikaciju parazita u vidnom polju ili jedinici volumena materijala. Posebno, malarija (naročito kada je detektiran R.Gakpragit) važnu određivanje intenziteta parasitaemia.

Kvantifikacija mikroflore u razmazu, i identificiranje mikrobne zajednice su važni u određivanju kada je to potrebno etiološki uloga uvjetno patogenim klicama. Poznato je da se maksimalna koncentracija detektirati bakterija u razmazu nativnog materijala 10  Stanice u 1 ml. Za većinu materijala smatra se etiološki značajno detekcije oportunističkih bakterija određene vrste u koncentraciji od najmanje 10 -10  stanica u 1 ml, tako da osjetljivost mikroskopskom metodom u većini slučajeva zadovoljava potrebe Clinical Microbiology.

Yushchuk ND, Vengerov YY

Dijelite na društvenim mrežama: