Limfokina aktivira stanice ubojice za imunizaciju. Utjecaj limfokina aktivira stanice ubojice u urođene imunosti

IL-2 ili egzogeni analoga stimuliraju proliferaciju stanica prirodnih ubojica i poboljšati svoje citotoksično djelovanje, što je dovelo do stvaranja tzv ubojica limfokina aktivira (Lak). Po svojoj prirodi, LAC su citotoksični limfociti, koji su sposobni uništiti stanice zaražene virusima ili intracelularne bakterije i tumorskih stanica. U ovom trenutku je mogućnost Lak terapije proučavao u raznim oblicima raka. Zaraznih bolesti adoptivni prijenos Postupak LAC praktički proučavali.
ovo pitanje Imali smo studirao na infekcije miševa K. pneumoniae K2 CBA kulture soja.

Limfokina aktivira ubojica ML pripravljen iz slezene miševa, kad kultivirane dva dana u RPMI-1640 mediju koji sadrži 1000 IU / ml IL-2, stanice su isprane i korištene u eksperimentu.
Morfogistohimicheskie studija Oni su otkrili da je LAK stanice predstavljaju veliki broj limfnim i upišite immunoblast prolymphocytes s bazofilne citoplazmi. Razmazuje se često nalaze u staničnoj diobi mitoze stanje. U fazi kontrast mikroskopom LAK stanice predstavljaju razmnožavanje konglomerata.

Dakle, kada Učinci IL-2 u MT slezena kod miševa je došlo Lak generacije, naznačen time, proliferaciju i aktivaciju limfoidnih stanica. Povećana ekspresija aktivacijskih-onnyh antigena tvore značajke imunofenotip LAC također potvrđuje aktivacije limfocita procesa. Osim toga, otkrili smo da LAC imali su značajno višu aktivnost ubojica u usporedbi s netaknutom ML u odnosu na NK-osjetljive stanične linije mišjeg limfoma YAC-1.

Prema uvriježenom mišljenju, NK - glavni subpopulacija limfocita koji eksprimiraju r75r lanca IL-2 receptora i selektivno aktiviraju i proliferacije pod utjecajem za formiranje LAC u stanju učinkovito liziraj ciljnih stanica tumora. Međutim, uz gore navedene ideje, postoje dokazi o postojanju stanovništva u LAC NKT stanica koje izražavaju ne samo NK (CD16, CD56) markera, ali i diferencijaciju T-antigena (CD3, CD4, CD8).

ti podaci u skladu raniji prijedlog NK-stanice, koje se smatraju ne samo kao zaseban subpopulacije, ali i kao fazi diferencijacije zrelih limfocita. Od zrelih limfocita inkubacijom s IL-2 može se pripraviti tzv NK-LAK stanicama.

u našem ML eksperimenti nakon kultivacije slezene s IL-2, dobiveni su LAC ekspresiju na njihovu aktivaciju membrane molekule (CD25) i molekule glavni HISTO kompatibilnost kompleks MHC I, MHC II. Istovremeno, u LAC populaciji NK osim prisutnih eksprimiraju stanice i diferencijaciju T-antigena (CD3, CD4, CD8).

Najnovije u istim količinama otkrivene su u početnoj populaciji ML. Tehnologija koja se koristi dobivanje limfokina aktiviranog ubojica Pod uvjetom da je značajan porast u NK-stanica s 1,5 do 20,3%, a stanice koje sadrže markera CD25 molekule i prikaz antigenske MHC I i II.

Nastala Suspenzija limfokinom aktivirane stanice ubojice je davan miševima intraperitonalno u 2,5 x 106 stanica u 0,5 ml 0,9% -tne otopine natrijevog klorida. Zatim, intraperitonealno injektira s 250 stanica u volumenu od 0,5 ml K pneumoniae K2. Kao kontrola korištena je ML uzgajane u prisutnosti PHA (10 ug / ml).

Limfokina aktivira ubojica inficirane K. pneumoniae (100 LD50) miševi osigurati 100% preživljenja životinja u gotovo istovremeno intraperitonealo mikrobnih stanica i ubojica. ML, PHA-aktivirani, zaštitom kod 50% na 100% ubijanja intaktnih miševa koji su primali istu dozu zaraziti.
naše istraživanje potvrditi izvedivosti o uporabi za adoptivnu imunoterapiju LAC, kao uveden u miševe intraperitonealno LAC K. pneumoniae K2 sprječava razvoj bolesti u životinja.

U određivanju citokina u mediju kulture su detektirani LAC povećan sadržaj IL-1, nakon 24 sata i 72 sata inkubacije (254 + 12,3 pg / ml i 213 ± 11,5 pg / ml, odnosno 72 sata) nakon - IL-6 (224 ± 21 2 pg / ml) i IL-10 (150 ± 10,5 pg / ml) u usporedbi s kulturom ml (sadržaj tih citokina u kontrola ne prelazi 25-80 ug / ml) inkubiraju se bez IL-2. Zanimljivo, u mediju za kulturu LAC nije povećanje sadržaja regulatornog IL-12, da smo u znatnim količinama utvrđenim u mediju kulture DK.

citotoksični Aktivnost limfokinom aktivirane stanice ubojice, izveden iz slezene miševa (CBA) određena je na NK-osjetljive YAC-1 stanična linija mišjeg limfoma u pokusu oporavak 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolij bromida (MTT-test). Stanice tumora (1 x 104 u 1 ml) se inkubiraju u mediju kulture s lak u različitim omjerima i apsorpcije na 540 nm je izračunata postotak stanica tumora za lizu (posto citotoksičnost).
Kvalifikacija ubojica aktivnost efektorskih stanica je pokazalo da posjeduju znatno veći LAC NK-djelovanje u usporedbi s miševima netaknuti ML.

U omjeru 1: 5, a Lak tumorske stanice Mišjeg limfoma YAC-1 citotoksična aktivnost stanica ubojica povećana 6 puta u odnosu na ML. U tim uvjetima, 15,5% ML lizirane staničnu liniju K562, dok u sličnim uvjetima LAC uzrokuje 92,2% smrti tumorskih stanica (p < 0,01). В меньших соотношениях мишени/эффекторы (1:2 и 1:1) эти различия не столь значимы, хотя цитотоксическая активность ЛАК превышает таковую у МЛ интактных мышей.