Poljoprivredni biotehnologija Biopesticidi

Video: aeroponic biljka, Institut za poljoprivrednu biotehnologiju, RosBioTech - 2013

sadržaj

Video: aeroponic biljka, institut za poljoprivrednu biotehnologiju, rosbiotech - 2013
Tehnologija proizvodnje bakterijskog pripravci entomopatogene
Tehnologija proizvodnje entomopatogene gljivičnih lijekova
Tehnologija proizvodnje boverina uzgojem gljivice površine
Tehnologija proizvodnje entomopatogene virusnih sredstava

Gubici poljoprivrede i šumarstva od štetnika insekata svake godine u svijetu se procjenjuje na oko 100 milijardi dolara. Za dugo vremena da se bave njima su korišteni pesticidi, ali, prvo, oni su često toksični za životinje i ljude, i, drugo, da se mnogo otrovnih kemikalija u kukci razviti otpornost. Sve to dovelo je do potrebe za pronalaženjem novih i učinkovit način borbe.

Najviše obećava je korištenje prirodnih uzročnika - mikroorganizmi čiji su toksini su uzrok smrti štetnika u svom prirodnom okruženju. Trenutno, u raznim zemljama svijeta proizvode više od 30 mikrobiološke entomopatogene droge. Oni se odlikuju visokom specifičnošću poraza određene vrste kukaca i gotovo potpunog bezopasan za ljude, toplokrvne životinje, ptice i korisne insekte.

Entomopatogene pripreme proizvedena na osnovi mikroorganizama izoliranih iz prirodnog okoliša i ponovno uveden u istim uvjetima kao i patogeni agensi ne uzrokuju neželjene promjene u ekosustavima i ne krši ekološke situacije u regiji.

Ruski mikrobiološke industrija proizvodi tri skupine entomopatogene pripreme:
1. Bakterijski pripravci na bazi Bacillus thuringiensis: entobakterin, dendrobatsillin, insektin, toksobakterin.
2. Pripravak Gljivične boverin temelji gljiva Beauveria bassiana.
3. Pripravci na bazi nuklearna polyhedrosis virusi: Virin-Hinche i Virin-EX.

Svi mikrobnih patogena proizvedene u obliku praha za prskanje ili pasta, manje granule, emulzije i kristala.

Kad izravna primjena često uključuju različite dodatke kao otapala, emulgatori, poboljšati njihovu učinkovitost.

Tehnologija proizvodnje bakterijskog pripravci entomopatogene

Od svih entomopatogene bakterije, najraširenija gram-pozitivna bakterija Bac. thuringiensis, koji se, osim formiranje spora, uzrokujući septikemije insekata gutanjem njegovog tijela za vrijeme kultivacije proizvodi niz toksičnih spojeva koji povećavaju učinkovitost preparata pripremljenih na svojoj bazi.

Među takvim toksičnih produkata koji su dobiveni pomoću ove bakterije podijeljen je u četiri dijela:
1.-egzotoksin (fosfolipaza C) - proizvoda uzgoj bakterijskih stanica. On uzrokuje razgradnju bitnih fosfolipidi u tkivima insekata koji dovodi do njihove smrti.

2. b-egzotoksin ili termo-stabilan toksin. On se nakuplja u rastu symbatically stanica tekuće kulture. Njegovo djelovanje je posljedica inhibicije djelovanja DNA-ovisne RNA polimeraze, što rezultira prestanka sinteze RNA u stanicama insekata, i njihove smrti. Djelovanje ovog otrova je vrlo sporo.

3. 8-endotoksina. Predstavlja kristalni protein (koji ima oblik redovitih kristala). On ne ističe u mediju kulture, a ostaje unutar bakterije. Vrši toksične efekte u probavnom traktu insekata, uništavajući svoj enzimatski sustav.

Poznato je da je bakterija skupine Bac. thuringiensis antagonistički 130 minuta vrste kukaca nametnika, uključujući područja, povrća, voća usjeva, vinograda i šuma. Najveći učinak postiže kada koristite ovu skupinu lijekova s obzirom na list jedu štetočine.

Sposobnost Bac. thuringiensis čine razne toksične proizvode, spore, kristali se koriste u industriji za proizvodnju na osnovu ovog mikroorganizama širok izbor različitih entomopatogene pripreme.

Svi bakterijske entomopatogene pripreme na temelju Bac. thuringiensis proizvedena od istog procesa shemu. Tehnologija proizvodnje uključuje sve faze, tipične za bilo koje mikrobiološke proizvodnje temelji se na metodi proizvodnje duboke mikroorganizama: Uzgoj sjemena u laboratoriju i industrijske apparate- sijanje uzgoj u kulturi fermentatore- koncentracija zhidkosti- sushku- standardizacije i pakiranje gotovog proizvoda.

Ako se dobiva sjeme u obliku spora, u svim fazama proizvodnje kulture korištenjem kulture medija istog sastava. Tipično, taj kvasac polisaharid medij koji sadrži (u%): hranjivog kvasca - 2-3 palentom - 1-1,5- kashalotovy mast - 1. Ako se ne namjerava uzgoj sjemena da ga dovede u fazi formiranja spora, u sijačica koristi više koncentrirana okruženje nego u industrijskim fermentora.

Prije početka pH medija za kulturu nije prilagođen: dodavanje svih komponenti, on je postavljen obično oko 6.3. Na kraju fermentacije, pH se povisi na 8-8.5. Postupak se završava na uzgoj stupanj 90-95%, a sporulizatsii sporama titrom koji nije manji od 109 u 1 ml. Gotov tekućina kulture je pumpa u odvojenog prikupljanja sterilizirane zakiseli do pH 6-6,2, i prenositi u koraku separacije. Kao rezultat razdvajanja dobivenog paste vlažnosti od 85%, s prinosom od oko 100 kg po 1 m tekućine za kulturu. Proizvodnja krajnji produkt može biti prah koji stabilizira ili pasta.

Prvi je dobiven sušenjem zalijepiti na sušilicu raspršivanjem s ostatkom vlage od 10% i miješanjem s kaolina. Drugo - što u karboksimetilceluloza tijesto (CMC). U ovoj izvedbi gotov proizvod je viskozna tekućina svijetlo sive boje, homogena u sastavu ne smrzava za vrijeme skladištenja, bez mirisa, ne podliježe propadati ili fermentacija.

Tehnologija proizvodnje entomopatogene gljivičnih lijekova

Entomopatogene preparata na bazi mikroskopskih gljivica koje mogu zaraziti veliki broj štetnika, nanoseći im bolesti - atletskog stopala. U usporedbi s bakterijama i virusima gljivice imaju niz mogućnosti: a) nema gubitaka kroz probavni trakt, i izravno kroz tkiva-b površine) insekti utječu na fazi kukuljice, kojoj se ne uočava kada je izložen mikrobni preparatov- c) gljive karakterizirani relativno visoka stopa rasta i ogroman reproduktivni sposobnostyu- spor može biti dugo vremena u prirodnom okruženju bez primjetnog smanjenja entomopatogeni aktivnosti.

Učinci na gljivične postupak polazi od insekata gljivičnih spora prodiranje u šupljinu tijela spremnika kroz kožu. Jednom u tijelu kukaca, gljivične spore klijati u Gifu, zatim raste u miceliju od kojih otchlenyayutsya hifalne stanice - konidija sadrže infektivnih jedinica entomopatogene gljive. U pravilu, gubitak dolazi iz velike količine toksina koje proizvode gljivice.

Ako dovoljno toksin ili insekt nije osjetljiv na to, smrt dolazi nakon vlaknastog micelija ispunjava cijelo tijelo insekta, koji utječu prvenstveno mišića. Ovisno o veličini smrti kukca dolazi u razdoblju od dvije do osam dana.

Rusija proizvodi od gljiva droge boverin temelji na gljivice od Beauveria. Ovaj lijek se koristi za uništavanje oko 60 vrsta štetnika, osobito kukaca. To je bezopasna za toplokrvne životinje i ljude, to ne uzrokuje opekline biljke.

Boverin dobiven rabeći duboku i plitku industrijsku uzgoj soja gljivica.
Pripravak boverina podvodnom pripravka kultivacije boverina ovog postupka se provodi u strogo aseptičkim uvjetima. Sastav hranjivom mediju obuhvaća sljedeće elemente (u%): kvasac krmne - 2- škrob -1 - natrijev klorid - mangan klorid 0,2 - Kalcijev klorid 0,01 - 0,05.

Trajanje uzgoja tri ili četiri dana pri temperaturi od 25-28 ° C za kultivaciju od gljiva izvodi se pod uvjetima konstantnim miješanjem i prisilnog prozračivanja. Tijekom uzgoja dubokog gljiva tijekom prvog dana i pol, prehrambeni kvasac potpuno liziraju i gljiva odvija tijekom tog vremena svim fazama rasta. Do kraja punog sazrijevanja gljiva je dodijeljen najveći broj enzima koji dovode do lize micelija i konidijski promiče akumulacija. Gotov tekućina kulture je podvrgnut separaciji ili filtriranjem.

Nakon filtriranja, dobivena pasta je 70-80% sadržaja vlage, koji se šalje u sušilicu raspršivanjem. Sušena spore fini prah 10% vlage. Dobiveni prah je standardiziran potrebnu količinu kaolin, ponekad aditiva u gotovom pripravku se daje za kvašenje i ljepila.

Tehnologija proizvodnje boverina uzgojem gljivice površine

Ova metoda je više vremena i naporan, pa je ograničeno korištenje. Površna gljivične kultivacija provodi u tekućem mediju, a polučvrsti na ove medijske gljiva ima dobru stopu rasta. Njegova mikrobiološka proizvodnja završena u stadiju spora reproduktivnoj filma koji se potom ukloni, suši, mase i prema potrebi odgovarajuća količina punila je standardizirano.

Među mogućim tehnika koje se koriste u proizvodnji površine boverina kultiviranje razlikuje: a) kultiviranje gljiva u tekućem mediju bez autoklavu, a miješanje aeratsii- b) kultiviranje u autoklavu na čvrstim bez miješanja i prozračivanje. Ove tehnike temelje se na činjenici da je gljiva raste dobro u različitim supstrati - otpadnih poljoprivrednih proizvoda.

Uzgoj gljiva u tekućem mediju bez autoklavu, uz miješanje i propuhivanje zraka vrši se bez prethodne sterilizacije mediju, zagrijava se samo na refluksu, izlivena u drvenim okvirom prekriven plastične folije na unutarnjoj strani. Medij se ohladi do 30-40 ° C, cijepljena sa suhim spora. Top skele prekriven polietilenski film koji nakon formiranje gljiva spora koja nosi film se ukloni. Kao medij koristi različite, kao što je juha iz šećerne repe, krumpir, bundeva, zrna brašna.

U procesu rasta gljivica na čvrstim autoklavu bez miješanje i aeraciju daje odvojenom sterilizacije spremnika postavljenih hranjivom mediju (sladovine agaru, krumpir, mrkva, kukuruz, lubenice raslojavanje) četrdeset minuta pri 110 ° C Sterilni supstrata se suhi spore spremnik supstrat se mućka u homogenoj razdiobi inokuluma i ostavi da stoji na sobnoj temperaturi 18-23 ° C

Obrazovanje conidiospores završeni do kraja 12-15 dana. gljiva kultura ostaci iz supstrata je uklonjena iz spremnika, te osuši na police na 25-28 C. Priprema konačnog proizvoda je završena mljevenjem materijala u fini prah.

Tehnologija proizvodnje entomopatogene virusnih sredstava

Od svih entomopatogene virusnih agenti imaju najveću specifičnost za domaćina insekata: oni obično utječu samo jednu vrstu, pa su gotovo u potpunosti bezopasne za biljke, životinje i ljude.

Virusi se odlikuju visokom otpornošću na štetnih utjecaja okoline (temperatura, vlaga), oni su u stanju zadržavaju svoju aktivnost kroz 10-15 godina, što je izvan kukaca.

Infekcija nastaje kada hranjenje virusa insekt. Zarobljena u crijevima virusa uzrokuje ući u tjelesne stanice, a replikacija virusa pojavljuje u jezgrama tih stanica. Oslobođeni virusi inficiraju ostale stanice dok insekt ne umire.

Posebnost proizvodnje virusa je da se razmnožavaju samo u živom tkivu. Stoga je proizvodnja virusa pripremu razlikuje od onih smatra bakterijske pripravke.

Tehnologija bilo virusnih lijekova počinje s uzgojem insekte domaćina na umjetnim podlogama, osiguravanje njihove fiziološki zdravo stanje. U određenom stupnju razvoja (obično u koraku gusjenica) kukaca inficiranih dodavanjem virusnih suspenzija u hrani. U tom pre-inokuluma se dobiva iz nekoliko pacijenata ličinki.

Nakon izlaganja za maksimalnu akumulacije virusa u tkivima kukaca (7-9 dana), mrtve larve su skupljene, njihovi osušen na 30-35 ° C, po tlu mehaničkim postupkom za izlaz stanice iz tkiva inkluzije. Dobivena masa se doda otopina soli i destiliranom vodom brzinom od 1 ml po gusjenice, miješana i filtrirana (centrifugira).

Spreman pripravci su proizvedeni u obliku vodenih otopina, uljnih otopina, suhe praške, paste i m. P.

LV Timošenko, SN Chubik

Dijelite na društvenim mrežama:

Povezan