Određivanje aktivnosti proteina C sa sustavom

Gen odgovoran za sintezu proteina C, lokaliziran na kromosomu 2 (ql3-ql4). Osnovna funkcija ovog fiziološke antikoagulansa je glavni ne-enzimsko inaktiviranje faktora zgrušavanja (FVa, FVIlla).

Video: Uređaj za uklanjanje toksina iz tijela

Bolesnici s prirođenim nedostatkom proteina C, postoji tendencija da se rekurentne tromboze i tromboembolije. Nedostatak proteina C nasljeđuje autosomno, homozigoti i dvostruki heterozigoti umrijeti u ranom djetinjstvu od tromboze.

Princip metode

Metoda se temelji na procjeni APTV smjese (razrijeđenog uzorka BPT, proteina C, proteina plazmom C aktivatora, APTT reagens). Protein C aktivira se PRP ispitni uzorak reagens pripravljen bjelouška zmijskog otrova iz Agkistrodon contortrix. Aktivirani protein C koagulacija uništava faktora Va i Vila, koji se nalazi u test uzorku u smjesu, zatim se doda proteina C s nedostatkom plazme time produženje aPTT u bilježi se nakon dodavanja kalcijevog klorida. Pri niskom aktivnošću protein C se izražava blago produženje od APTV. Uzorak razrjeđenja kalibracije dopuštaju BTP krivulja i za određivanje aktivnosti protein C.

Video: dušikovih oksida (NO)

Reagensi i oprema

• Protein C aktivatora (Protac).
• APTT.
• Nedostaje protein C plazmi.
• Otopina kalcij klorida (0,025 M).
• Pufer otopina.
• PRP uzorka s poznatom aktivnosti proteina C.
• Koagulometrijski.

Uzorci krvi za istraživanje

Za određivanje aktivnosti proteina C se koristi BPT,

Nadalje dobiva uzorke kalibracije Test uzorak razrijeđen s puferom otopine u omjeru 1:10.

Evaluacija rezultata studija

Konstruirati kalibracijske krivulje zahtjeva BPT uzorak poznatog djelovanja protein S. konstruirati pomoću kalibracijske krivulje vremena koagulacije u sekundama, dobivenog u proučavanju razrijeđenih kalibracijskih uzoraka s poznatim aktivnosti proteina C.

Interpretacija rezultata istraživanja

Klinička slika prirođene nedostatak proteina C dominira rekurentne venske tromboze i tromboembolije. Broj pacijenata koji kutani nekroze, pobačaj, i drugi. U djece s nedostatkom protein C se često opaža maligni sindrom (purpuru fulminans).

Stečena nedostatak proteina C može biti zbog neadekvatne sinteze hepatocita, povećane potrošnje zbog motora s unutarnjim izgaranjem, liječenje s neizravnim zgrušavanja i drugih. Neki bolesnici s VA primijetio preuveličavanja njezine aktivnosti.

Uzroci pogrešaka

• Pogreške Predanalitika fazi studije.
• Kontakt s heparinom proučavao krv iz venskog katetera.

Ostale analitičke tehnike

Funkcionalna aktivnost određena amidolitičkog ili koagulacije postupcima protein C.

Video: D. Mavrodi Predavanje # 3 "Uloga izlučivanja sustava treće vrste proteina u ..."

Da se odredi koncentracija proteina C pomoću ELISA, međutim, kada se uspoređuju rezultati imunoloških i funkcionalne tehnike neusklađenost rezultati opaženi kod pacijenata s molekulske abnormalnosti proteina C.

S aktivnost proteina

Protein S - vitamin K ovisna o glikoprotein uključeni kao ne-enzimske kofaktor aktiviranog proteina C proteolitičke razgradnje i Va Villa faktora koagulacije. Gen odgovoran za sintezu proteina S, nalazi se na kromosomu 3 u ljudskom položaju pll.l-qll.2. Protein S u krvi je dostupan u dvije izvedbe: kao slobodna proteina (približno 40%), a što je povezano s S4 komponente komplementa (oko 60%). Smanjenje aktivnosti protein S povećava rizik od tromboze i tromboembolije.

Princip metode

Funkcionalne tehnike temelje se na registrirani ozbiljnosti produžetaka smjesa zgrušavanja protein S manjkav u plazmi i u plazmi, ispitani kada se daje u aktivirani protein C. Ispitivanje-sustav za procjenu vremena zgrušavanja na sličan testnog sustava proizvođači koriste različite koagulacije stimulanse (Russell zmijskog otrova, APTT reagens faktor aktivirani koagulacijski IX ili dr.). Kod normalnog proteina S sadržaja pod utjecajem aktivirani protein C uzrokuje značajno produljenje vremena zgrušavanja (zbog uništenja neenzimskih faktora koagulacije), dok nedostatak proteina S izražava mnogo slabije (zbog neučinkovite razaranje neenzimskih faktora aktivirani protein C).

Reagensi i oprema

• nedovoljan plazma proteina S.
• Sredstvo za aktivaciju (fosfolipidi, Russell zmijskog otrova ili drugih aktivatori, heparin neutralizaciju, i sl.)
• Aktivirani protein C.
• Otopina kalcij klorida (0,025 M).
• Pufer otopina.
• PRP uzorka s poznatim sadržajem proteina S.
• Koagulometrijski.

Uzorci krvi za istraživanja kako bi se utvrdilo aktivnost proteina S pomoću PPP-a.

Zatim, smjesa je pripravljen i istraženi uzorci BPT pufer otopine se razrijede 1:10.

Metode određivanja

Tijek određivanja proteina S aktivnost značajno varira pomoću reagensa i opreme različitih proizvođača, pa je akcija slijed laboratorij liječnik mora strogo u skladu s uputama za kit reagensa i prilagoditi ga postojećim laboratorijima u Koagulometrijski.

Evaluacija rezultata studija

koagulacija studija puta razrijeđeni uzorci PrP s poznate koncentracije proteina S omogućava konstruiranje kalibracijske krivulje za određivanje aktivnosti ovog fiziološke antikoagulansima posto normalne.

Kod zdravih osoba, aktivnost proteina S u rasponu od 60-130%.

Interpretacija rezultata istraživanja

Kongenitalna nedostatak proteina S - rijetka mana antikoagulans hemostaza. Prvi opis nedostatka proteina S je uveden u 1984 NR Schwarz i suradnici. Klinička slika bolesti dominira rekurentnim flebotromboza i tromboembolije. Kao i mnoge druge nedostatke antikoagulantne hemostaze, ova patologija se prenosi autosomno. Razlikovati tri vrste prirođene nedostatak proteina S.

Mogućnosti kongenitalna protein S nedostatak

• Tip: ja Koalicija metoda: Snizhen- Besplatno Protein S: Protein Ukupno Snizhen- S: Smanjen.
• Vrsta: Drugi Koalicija metoda: Snizhen- Besplatno Protein S: Normalizacija ukupnih proteina S: norma.
• Tip: III Koalicija metoda: Snizhen- Besplatno Protein S: Protein Ukupno Snizhen- S: norma.

Tip I je karakteriziran niskim sadržajem proteina S pomoću njihove imunološko određivanje različitih spojeva, kao i smanjiti njegovu funkcionalnu aktivnost. U tipu II nedostatak primijetio pad u funkcionalnoj aktivnosti, međutim, ukupni i slobodni protein S frakcija nije povrijeđeno. Tip III prikazano je u kombinaciji smanjenjem funkcionalnu aktivnost slobodnog proteina S i njegove frakcije. Tako, za identifikaciju tipa Proteina S, potrebno je koristiti koagulacije i imunoloških postupaka za to određivanje.

U kliničkoj praksi je puno više zajedničkog stekao nedostatak proteina S. smanjene aktivnosti proteina, može se pronaći u nefrotski sindrom, trudnoća, terapiju estrogenom, L-asparaginaza, i dr. U djece s nedostatkom proteina S primijetio maligni sindrom (purpura fulminans).

Uzroci pogrešaka

• Heparin od venski kateter.
• Hemolizu u ispitnom uzorku krvi.
• Točna doza od citrata pri uzimanju krvi.

Ostale analitičke tehnike prilično raširena metoda temelji se na korištenju ELISA za određivanje slobodnog proteina S i S4 povezan s komponenta komplementa. Također opisano (ali ne i na tržištu) funkcionalna metoda određivanja tog antikoagulans, koji se temelji na korištenju kromogenog supstrata.